干扰素（Interferon, IFN）是在特定的诱导剂作用下，一类由细胞分泌的，在同种细胞上，具有广谱抗病毒、抗肿瘤和调节免疫功能等活性的细胞因子。其活性受基因的调控，涉及RNA和蛋白质的合成环节。自发现以来，IFN的研究是细胞因子研究中最活跃、进展最快的领域之一，也是病毒学、细胞学、分子生物学、免疫学和肿瘤学等相关领域的研究热点。我国是养猪大国，猪的各类疾病，尤其是病毒性疾病一直严重危害着养猪业的发展，降低了经济效益，迫切需要研制高效低成本的抗病毒和增强免疫效果的药物。基于猪IFN具有广谱抗病毒、抗肿瘤及免疫调节作用，如何有效的将猪IFN应用于猪病的防治，已成为研究热点。猪IFN分为Ⅰ型和Ⅱ型，目前已知并且被广泛研究的有α、β和γ三种。IFN-α、β属于Ⅰ型，具有抑制病毒复制和抗肿瘤的作用；IFN-γ属于Ⅱ型，除具有抗病毒作用外，参与细胞主要组织相容性复合物（Majorhistocompatibility complex, MHC）抗原的表达和免疫调节反应，在免疫调节中有重要作用。本实验目的是探索原核、真核表达的重组猪IFN在不同细胞系上抑制不同病毒增殖的作用。利用pGEX-6p-1原核表达载体，构建了猪IFN-α、β、γ基因的原核表达载体，诱导表达出部分可溶的重组猪IFN蛋白后，进行纯化。将蛋白免疫BALB/c小鼠，分别制备了效价在1:10,000以上的猪IFN-α、β、γ多克隆抗体。同时将猪IFN-α、β、γ基因连接到转移载体pFastBacTMHTB上，构建了猪IFN-α、β、γ重组Bacmid杆状病毒载体，利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统，在sf9昆虫细胞中成功表达出重组猪IFN-α、β、γ蛋白。用细胞病变抑制法，在PRRSV（猪繁殖与呼吸综合征病毒）/Marc-145和VSV（水泡性口炎病毒）/MDBK系统上对原核和真核表达的重组猪IFN-α、β、γ蛋白进行抗病毒活性检测。结果表明，原核和真核表达的重组猪IFN-α、β、γ蛋白都具有显著的抗PRRSV和VSV的活性。其中，重组猪IFN-α抗病毒活性较高，约为猪IFN-β活性的2倍，猪IFN-γ活性的2-6倍。并且sf9昆虫细胞真核表达的重组猪IFN蛋白活性是原核表达的重组猪IFN蛋白活性的1-4倍。在抗病毒活性实验中，重组猪IFN-α、β、γ蛋白对PRRSV的抗病毒活性达到105-106U/mg，说明表达的重组猪IFN有成为治疗猪繁殖与呼吸综合征，乃至其他猪病的蛋白类药物的潜力。