【摘 要】
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目的以食品和农产品原料加工残余物为对象筛选碳量子点（CDs）合适的碳前体原材料,并合成CDs。基于该CDs建立相关快速、灵敏检测VB12的碳量子点荧光探针,并应用于血清样品VB12含量的快速检测,验证其灵敏度、特异性及精密度,探索其在生物样品检测领域应用中的实用性和可靠性。方法根据荧光强度,激发波长,荧光量子产率（QY）以及对VB12的淬灭效率,筛选构建VB12的CDs检测探针的碳前体最佳材料;通
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目的以食品和农产品原料加工残余物为对象筛选碳量子点（CDs）合适的碳前体原材料,并合成CDs。基于该CDs建立相关快速、灵敏检测VB12的碳量子点荧光探针,并应用于血清样品VB12含量的快速检测,验证其灵敏度、特异性及精密度,探索其在生物样品检测领域应用中的实用性和可靠性。方法根据荧光强度,激发波长,荧光量子产率（QY）以及对VB12的淬灭效率,筛选构建VB12的CDs检测探针的碳前体最佳材料;通过真空高温制备生物炭,以超声辅助法从其提取生物质CDs,并对不同合成条件进行优化,以构建检测所需的荧光探针。通过透射电镜,傅利叶红外光谱、X单晶衍射等系列表征手段对所得CDs进行表征,以VB12为目标分析物,探究其相互作用及淬灭机理。将该探针用于检测医用VB12注射液,并与国家标准方法《GBT5009.217-2008》检测结果比较分析,验证方法精密度及准确性;进一步将探针应用于实际血清（大鼠和人）样本VB12检测及回收实验。结合膳食摄入情况、症状及临床诊断,判定人体VB12摄入不足的风险,同时验证该CDs探针方法的可靠性。结果筛选发现咖啡渣是相对较好的CDs碳前体材料,基于其制备出的咖啡渣碳量子点（CCDs）具有尺寸微小（0.86-4.56）nm,分散均匀,高荧光强度（＞750 a.u）,天然含有-N和-OH且结构类似于石墨的特点。结合VB12对CCDs的独特荧光淬灭效应,以CCDs为探针成功建立VB12检测方法,线性范围在（10～1×10~6）ng/m L,相关系数R~2=0.9982,检出限（LOD）为0.61 ng/m L。在实际样品医用VB12注射液的检测中,该探针法检测结果相比于国标法,其检出值更接近样品实际浓度,且RSD值（0.12%～1.21%）优于国标法检测的RSD（0.67%～1.88%）;且在大鼠血清和巨幼红细胞性贫血孕妇血清样品的检测中,该探针表现出检出范围宽,回收率高,检测时间短及可靠性强、灵敏度高、特异性强的特征。结论基于咖啡渣为前体材料而建立的咖啡渣碳量子点探针检测方法在医用VB12注射液和血清样品VB12检测中,具备检测时间短,检测范围宽,灵敏度高,特异性和可靠性强的优异特点,能够实现不同人群不同年龄及生理阶段VB12含量的普及型和动态性检测,进一步优化可作为未来生物样品VB12的检测方法。
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