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目的:本实验以盐酸异丙肾上腺素诱发ASIC3-/-小鼠心肌缺血模型,运用RT-PCR检测技术,观察针刺不同经脉腧穴对心肌缺血小鼠模型心肌细胞KATP通道基因Kir6.1、Kir6.2及其结合蛋白SUR2A、SUR2B和蛋白激酶PKA、PKC-β2 mRNA表达水平的影响,从心肌细胞三磷酸腺苷敏感钾通道和信息转导系统中蛋白激酶基因表达差异的角度来探讨在分子水平针刺内关穴对心肌缺血的作用机制,验证在痛觉受干扰的情况下循经特异性是否依然存在,为循经感传实质化研究提供依据。材料与方法:采用SPF级ASIC3-/-小鼠52只作为研究对象,参照随机数字表,从52只小鼠中随机抽取8只作为空白组。除空白组外,其余44只小鼠采用皮下多点位注射盐酸异丙肾上腺素(20mg·kg-1·d-1)建立心肌缺血小鼠模型,空白组小鼠在相同位置注射等量的生理盐水,并记录造模前后各组小鼠心电图。剔除造模过程中死亡的4只小鼠,将剩余造模成功的40只小鼠随机分成5组,分别为:模型组、内关组、列缺组、足三里组、非经非穴组,每组8只。在小鼠清醒状态下,对内关组、列缺组、足三里组、非经非穴组的小鼠分别给予相应穴位的电针刺激。选用“华佗牌”无菌针灸针(φ0.19×13mm)刺入皮下2mm左右,并连接G6805-AⅡ型电针仪,施以疏密波,频率4-20Hz,强度2mA,以小鼠尾端微微颤动为宜。留针时间为20min,每天1次,连续针刺7天,并在针刺治疗结束后再次记录各组小鼠心电图。空白组与模型组的小鼠不施加针刺,但每天以同样方法进行抓取和固定。实验的各组小鼠,均于针刺治疗结束后在辽宁中医药大学动物实验研究中心取材。将小鼠采用断脊法处死后,在无菌条件下开胸取出心脏并分离出左心室,放入已消毒并编号的EP管中,并滴加1ml Trizol试剂,用液氮迅速冷冻后,即刻放在-80℃的超低温冰箱中保存待测。应用实时荧光定量聚合酶联反应技术(RT-PCR)检测心肌细胞三磷酸腺苷敏感钾离子通道相关基因kir6.1、kir6.2、SUR2A、SUR2B和心肌细胞信息转导系统中蛋白激酶相关基因PKA、PKC-β2以及参考基因β-action表达量的变化,进行统计学处理。结果:1.与空白组比较,模型组、内关组、列缺组、足三里组、非经非穴组靶基因的相对表达量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。2.与模型组比较,内关组、列缺组、足三里组靶基因的相对表达量显著降低,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01),非经非穴组的差异无统计学意义(p>0.05)。3.与内关组比较,列缺组、足三里组、非经非穴组靶基因的相对表达量显著升高,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01)。4.与列缺组相比,非经非穴组靶基因的相对表达量升高,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01),足三里组靶基因的相对表达量差异无统计学意义(p>0.05)。5.与足三里组相比,非经非穴组靶基因的相对表达量升高,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01)。结论:1.电针内关穴、列缺穴、足三里穴均有抗心肌缺血的作用。2.与列缺穴、足三里穴相比,内关穴改善心肌缺血作用更显著。3.电针内关穴治疗心肌缺血具有循经特异性。4.循经特异性不受痛觉干扰。