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目的:本实验体外培养大鼠胶质瘤(C6)细胞,建立体外缺血及缺血再灌注损伤模型,采用real-time PCR和逆转录PCR检测p53和Mettl9两种基因在不同时间点的表达。方法:①体外培养C6细胞,建立体外缺氧缺糖及缺氧缺糖/复氧损伤模型,采用乳酸脱氢酶漏出率测定细胞损伤程度、MTT比色法测定细胞活力和流式细胞术检测细胞凋亡。②用Real-time PCR和逆转录PCR测定p53和Mettl9基因在不同时间点的表达。结果:1.不同缺氧/复氧时间对细胞LDH漏出率的影响:与正常组比较,缺氧组细胞LDH漏出率明显升高,具有统计学意义(p<0.01);与缺氧组相比,缺/复氧组细胞LDH漏出率明显上升(p<0.01)。2.不同缺氧/复氧时间对细胞活力的影响:与正常组比较,缺氧组细胞活力明显下降,差异有统计学意义(H4、H8、H12组p<0.01,H24组p<0.05),在12h细胞活力最低;与缺氧组比,缺/复氧组细胞活力明显增强(p<0.01)。3.不同氧/复氧时间对细胞凋亡率的影响:与正常组比较,缺氧组细胞凋亡明显增多(p<0.01),在缺氧12h处凋亡率达到最大,24h处凋亡率有下降趋势;与缺氧组比较,缺/复氧组细胞凋亡率明显上升(p<0.05)。4.Real-time PCR测定不同缺氧/复氧时间对p53和Mettl9基因的表达的影响:①Mettl9基因:与正常组比较,其表达在8h处开始明显上调(p<0.01),并具时间依赖性;在缺/复氧组,与缺氧组比较,H4/R8组(p<0.01)和H8/R8组(p<0.05) Mettl9的表达均明显上调,具统计学意义。②p53基因:缺氧8h、12h和24h表达均上调(p<0.01),以缺氧8h表达上调最明显;缺/复氧组,与缺氧组比较,除4h组,其余有下降趋势。5.逆转录PCR测定不同缺氧/复氧时间对p53和Mettl9基因的表达的影响:结果与Real-time PCR结果一致。结论:1.p53基因和Mettl9基因的表达上调可能参与了缺糖缺氧及缺糖缺氧/复氧所致C6细胞损伤。2.在缺糖缺氧及缺糖缺氧/复氧所致C6细胞损伤中,p53基因可能在一定程度上抑制Mettl9基因的表达。