pshuttle-Egr1-hSmac基因—放射治疗乳腺癌的体外抑瘤效应研究

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乳腺癌的临床治疗包括手术、放疗和化疗,浸润性导管癌是浸润性乳腺癌中最大的一类,研究其靶向治疗具有重要的临床意义。肿瘤基因-放射治疗是近年来肿瘤靶向治疗的研究热点之一,是根据放射治疗和基因治疗的各自特点,将二者联合应用,即将辐射诱导性基因的调控序列与肿瘤杀伤基因相偶联,转染肿瘤细胞,在对肿瘤实施局部放疗的同时诱导肿瘤杀伤基因表达的增强,产生辐射和基因表达产物的协同抑瘤作用。该疗法一方面将放疗与基因治疗有机地结合,发挥协同作用;另一方面,由于辐射具有靶向性和可控性,实现了对杀伤基因表达的时空调控。本实验充分利用Egr-1启动子具有辐射诱导特性,构建了含Egrl启动子和Smac基因的重组质粒pshuttle-Egrl-hSmac,转染人乳腺浸润性导管癌细胞MCF-7和MDA-MB-435,研究在电离辐射诱导下,该重组质粒携带的基因Smac mRNA及蛋白表达的时效和量效规律。进而观察其联合X射线照射后,对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435增殖、细胞放射敏感性、细胞周期进程和细胞凋亡等生物学特性的影响,从而评价该质粒联合X射线对人乳腺浸润性导管癌的杀伤效果。结果表明,重组质粒pshuttle-Egrl-hSmac中Smac mRNA和蛋白的表达具有辐射诱导表达特性,且在联合X射线照射后,对MCF-7和MDA-MB-435细胞具有明显的增殖抑制、辐射增敏和促凋亡作用,并可改变细胞周期进程;为提高基因-放射治疗效果开辟了新途径,为基因-放射治疗的临床应用提供理论和实验依据。
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