论文部分内容阅读
目的:建立芫花药材定性、定量的质量评价方法,全面了解药材的物质组成,完善质量标准;研究黄酮苷元的制备工艺和炮制的理论根据。为药材质量控制和开发利用提供依据。材料与方法:材料:芫花23批,黄芫花1批,来源见表1。芫花素、芫花酯甲对照品(中国中医科学院中药研究所),木犀草素对照品(中国药品生物制品检定所),芹菜素对照品(昆明科翔生物科技有限公司)。色谱甲醇(天津科密欧),色谱乙腈(天津协和),娃哈哈纯净水,其它试剂均为分析纯。方法:采用薄层色谱法、HPLC指纹图谱和LC-MS法进行定性分析;采用HPLC色谱法、紫外可见分光光度法进行定量分析;采用单因素、正交试验考察黄酮苷元的制备工艺。结果:1.对10批芫花及1批黄芫花进行薄层色谱鉴别,所选系统分离度较好,Rf值适中,能够区分正品和伪品。2.建立了13批芫花药材黄酮类成分指纹图谱库,确定了16个特征峰和两个分区:Ⅰ区为药材鉴别指纹区,Ⅱ区为药材质量评价区。3.对芫花中的黄酮类成分进行了LC-MS分析,初步鉴定了其中的15种成分。4.采用HPLC切换波长法同时测定芫花中芫花素和芫花酯甲的含量,方法线性良好,二者的平均加样回收率分别为97.7%,97.1%,RSD分别为2.28%,1.64%(n=5)。测定了5批生药、10批中试饮片,验证了炮制方法的稳定性。5.采用3种方法测定总黄酮含量,认为盐酸-镁粉显色法能够满足分析要求,具有结果可靠、重复性好等优点。6.比较醋炒、醋煮、水炒、水煮四种炮制方法下的炮制品与生品的含量差别,结果显示:醋制法确实能够降低毒性成分芫花酯甲的含量。7.通过单因素、正交试验得到了黄酮苷元的最佳制备工艺,即在100℃用2%的酸解液水解2小时。结论:1.优化了芫花药材的薄层色谱鉴别方法;建立的指纹图谱方法简便、准确、灵敏,直观即可区分芫花与其伪品,并能为药材的亲缘远近及质量优劣的判定提供依据;LC-MS分析提供了全面了解药材有效成分的途径,为进一步研究提供了参考。2.芫花素与芫花酯甲的同时测定方法、总黄酮测定方法均具有简便、可靠、重复性好等优点,可用于芫花药材质量控制。3.醋制能降低毒性成分芫花酯甲的含量,芫花炮制的关键在于辅料醋。4.水解法使苷类成分水解成苷元,降低了药材的刺激性并使有效成分得以富集,达到了增效的作用。从侧面验证了醋煮法炮制芫花的合理性:降低毒性的同时富集有效成分,即减毒增效。