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在养猪生产中,仔猪早期断奶是提高母猪生产力的关键技术之一,但早期断奶措施会对仔猪生理和心理产生影响,进而导致早期断奶应激。内质网是细胞中蛋白质加工和Ca2+贮存的主要场所,对应激原的刺激十分敏感,当各种应激原作用于细胞时,可诱导细胞发生内质网应激。内质网应激对于增强细胞对损伤的抵抗及适应能力具有重要意义。因此,仔猪早期断奶应激是否会诱导内质网应激的发生及内质网应激在早期断奶应激过程中的作用还有待进一步的研究。本试验内容主要包括以下三个部分：1.研究仔猪早期断奶应激是否会诱导肝脏内质网应激发生；2.研究HepG2细胞在不同营养素缺失培养条件下内质网应激发生及其营养调节；3.用不同亮氨酸添加水平(亮氨酸含量分别为1.66%、2.1%和2.44%)日粮饲喂早期断奶仔猪,研究亮氨酸对仔猪早期断奶应激诱导的肝脏内质网应激的调节作用。本研究结果显示：1.运用透射电镜观察14日龄开始断奶的大白猪仔猪肝脏中内质网形态时发现,与对照组(未断奶仔猪)相比,早期断奶仔猪在15日龄时肝脏内开始有内质网扩张现象,在16日龄时肝脏内质网扩张程度加深；运用Western blot技术检测发现,与对照组相比,早期断奶仔猪在15日龄时,肝脏细胞核中未折叠蛋白反应关键蛋白XBP1的表达量升高(P<0.05),在18日龄时,肝脏细胞核内XBP1表达量升高(P>0.05),表明早期断奶仔猪肝脏中发生了内质网应激；2.运用Western blot技术检测EBSS、低葡萄糖、无葡萄糖、无亮氨酸和无氨基酸培养基处理后的HepG2细胞中内质网应激相关蛋白表达量发现,EBSS处理能使细胞核内的ATF4表达量显著升高(P<0.05)；低葡糖糖处理时,细胞质内的ATF4表达量显著升高(P<0.05),细胞核内的ATF4表达量极显著升高(P<0.01)；无葡萄糖处理的HepG2细胞的细胞质和细胞核中ATF4均显著升高(P<0.05),细胞质中的ATF6a和CHOP表达量也显著升高(P<0.05)：无亮氨酸处理时,细胞质中XBP1的表达量显著降低(P<0.05),CHOP的表达量显著升高(P<0.05),细胞核中ATF4和ATF6a的表达量也显著升高(P<0.05)；无氨基酸处理时细胞质中的CHOP表达量显著升高(P<0.05),细胞核中的ATF4表达量也显著升高(P<0.05)。试验结果表明以上五种处理都会使HepG2细胞发生内质网应激,激活未折叠蛋白反应。且无亮氨酸培养基处理细胞2h时,内质网应激相关蛋白ATF4(细胞质中)、ATF6a(细胞核中)和XBP1(细胞核中)表达水平较对照组升高(P<0.01),无亮氨酸培养基处理细胞4h时,内质网应激相关蛋白表达水平较处理2h组下降(P>0.05)。3. HepG2细胞经亮氨酸饥饿后重新补充亮氨酸,用Western blot检测ATF4和ATF6a的表达情况发现,补充亮氨酸(其终浓度为10mM)后,细胞核中ATF4和ATF6a的表达量均下降(P<0.05),表明细胞中因亮氨酸缺失诱导的内质网应激有所缓解；用不同亮氨酸水平日粮饲喂仔猪后,Western blot检测其肝脏中内质网应激相关蛋白ATF4的表达情况,发现饲喂亮氨酸水平为2.1%和2.44%日粮的断奶仔猪肝细胞核中ATF4的表达量较对照组(亮氨酸水平为1.66%)降低(P<0.05),表明亮氨酸对仔猪早期断奶应激诱导的肝脏内质网应激具有一定的调节作用。综合上述试验结果,可得出以下结论：仔猪早期断奶应激能诱导肝脏内质网应激发生；早期断奶仔猪日粮中亮氨酸水平分别为2.1%和2.44%时能缓解仔猪早期断奶应激诱导的肝脏内质网应激。