论文部分内容阅读
钙蛋白酶系统是一种控制肌肉蛋白质降解的限速酶,主要控制着肌纤维蛋白的降解,与肌原纤维的增长和宰后肉质嫩化有密切关系。钙蛋白酶系统主要包括钙蛋白酶(calpain,CAPN)和钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin,CAST)。钙蛋白酶(calpain,CAPN)是一种存在于肌原纤维Z盘附近以及肌质网膜上的一种中性钙依赖性半胱氨酸蛋白酶,与肌原纤维的更新和动物宰后嫩度的变化密切相关。钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin,CAST)是一种内源性、专一抑制calpain活性的蛋白酶抑制剂,屠宰后可抑制钙蛋白酶活性,降低蛋白质水解,从而影响肌肉的生长和嫩度。
为探索钙蛋白酶基因Ⅰ和钙蛋白酶抑制基因在地方品种鸡之间以及和外来品种鸡之间的表达差异,本研究选取岑溪古典三黄鸡、良凤花蛋鸡、广西乌鸡和巨东回香鸡等广西4个地方鸡种和外来鸡种爱拨益加(AA)鸡为试验材料,利用组织切片技术观察5个品种鸡的胸肌和腿肌的肌纤维密度和肌纤维直径。并采用半定量RT-PCR技术检测CAPNI基因和CAST基因在不同品种鸡和组织中的表达水平。结果表明:
(1)5个品种鸡中,外来鸡种AA鸡的肌纤维密度最小,但肌纤维直径最大,与其他4组本地鸡种差异显著(P<0.05)。
(2)岑溪古典三黄鸡的肌纤维直径显著大于其他3组本地鸡种(P<0.05),而肌纤维密度显著低于良凤花蛋鸡、广西乌鸡和巨东回香鸡(P<0.05);但巨东回香鸡和良凤花蛋鸡之间差异不显著(P>0.05),广西乌鸡的肌纤维密度显著高于其他3组广西地方优质鸡种和AA鸡(P<0.05),肌纤维直径最小(P<0.05)。
(3)性别因素,CAPNI基因在岑溪古典三黄鸡公鸡、广西乌鸡公鸡、良凤花公鸡和巨东回香鸡公鸡之间的胸肌中表达量不同,但无显著差异(P>0.05),都显著高于AA鸡公鸡(P<0.05),同样,在4组地方品种鸡的公鸡腿肌中CAPNI基因的表达量差异不显著(P>0.05),都显著高于AA鸡公鸡腿肌(P<0.05)。CAPNI基因在岑溪古典三黄鸡母鸡、广西乌鸡母鸡和巨东回香鸡母鸡的胸肌和腿肌中表达水平分别显高于良凤花蛋鸡和AA鸡母鸡的胸肌和腿肌(P<0.05),良凤花蛋鸡的胸肌和腿肌中CAPNI基因的表达水平分别显著高于AA鸡母鸡的胸肌和腿肌(P<0.05)。相反,CAST基因在AA鸡公鸡的胸肌中表达水平显著高于其他4组地方品种鸡公鸡(P<0.05),在4组地方品种鸡公鸡之间差异不显著(P>0.05);同样,CAST基因在4组地方品种鸡的公鸡腿肌中的表达量差异不显著(P>0.05),都显著低于AA鸡公鸡腿肌的CAST基因表达量(P<0.05)。而CAST基因在AA鸡母鸡的胸肌和腿肌中的表达水平均分别显著高于其他4组地方品种鸡母鸡(P<0.05)的胸肌和腿肌中的表达量,其中,良凤花蛋鸡的CAST基因在胸肌和腿肌的表达水平分别显著高于岑溪古典三黄鸡、广西乌鸡和巨东回香鸡母鸡的相同组织中的表达水平(P<0.05)。而分别在广西乌鸡、岑溪古典三黄鸡和巨东回香鸡母鸡的胸肌和腿肌中CAST基因的表达水平差异均不显著(P>0.05)。
(4)组织间的差异,在肝脏组织中,AA鸡CAPNI基因和CAST基因表达水平均显著低于其余4组地方鸡种(P<0.05),而在4个地方鸡种之间CAPNI基因和CAST基因在肝脏中的表达水平差异均不显著(P>0.05)。同时,CAPNI基因和CAST基因在肌肉组织中的表达量均显著高于肝脏中(P<0.05)。CAPNI基因在每个品种鸡的胸肌和腿肌中的表达量差异不显著(P>0.05),但都显著高于该品种鸡的肝脏组织中的表达水平(P>0.05)。但是,在良凤花公鸡、广西乌鸡的公鸡、巨东回香鸡公鸡和AA鸡公鸡的腿肌中CAST基因的表达水平最高,显著高于胸肌和肝脏(P<0.05),其中,胸肌的表达量又显著高于肝脏组织(P<0.05);而CAST基因在岑溪古典三黄鸡公鸡和母鸡、良凤花鸡母鸡、广西乌鸡母鸡、巨东回香鸡和AA鸡的母鸡的胸肌和腿肌中的表达水平差异不显著(P>0.05),但都高于肝脏(P<0.05)。
以上结论表明,广西本土鸡种的肌纤维直径和密度与AA鸡有显著差异,同时CAPNI基因和CAST基因在广西地方优质鸡的肌肉和肝脏中的表达量与AA鸡也有显著差异(P<0.05)可以初步推测CAPNI基因和CAST基因可以作为鸡嫩度候选基因。