论文部分内容阅读
目的：观察阿魏酸钠对MCAO大鼠缺血再灌注损伤的保护作用与p38MAPK信号通路的相关性，探讨其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制，拓展该药的研究和应用范围，为其临床预防和治疗缺血性脑血管疾病提供实验基础和理论依据。 方法：采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉（middle cerebral artery,MCA）建立局灶性脑缺血实验模型，观察不同剂量的阿魏酸钠（sodium ferulate,SF）（100mg.kg-1、50mg.kg-1、20mg.kg-1）及 p38MAPK的抑制剂 SB203580对脑缺血再灌注损伤后大鼠的神经行为学评分及脑梗死体积的影响；分别采用 TUNEL法、Western-blot法及免疫组化法检测凋亡细胞的数量改变和 p38MAPK、p-p38MAPK、TIMP-1、MMP-9蛋白的表达以及Fas、FasL阳性细胞的表达情况。 结果：1.神经行为学评分：假手术组无神经行为学改变，SF100mg.kg-1、SB203580及SB203580+SF100mg.kg-1组神经行为学评分明显低于缺血再灌注(ischemic-reperfusion，I/R)组（p<0.05）。2.脑梗死体积百分比：假手术组未见梗死灶，SF100、50mg.kg-1组及SB203580、SB203580+SF100mg.kg-1组脑梗死体积百分比（％）明显小于缺血再灌注I/R组（p<0.05）。3.凋亡细胞：SF100、50mg.kg-1组及SB203580、SB203580+SF100mg.kg-1组TUNEL阳性细胞率（%）均较I/R组明显下降（p<0.05）；SF100mg.kg-1组与SB203580组组间比较未见差异。4.p-p38MAPK蛋白表达：假手术组未见p-p38MAPK蛋白表达，I/R组p-p38MAPK显著增高（p<0.05），SF对脑组织总p38MAPK表达影响不明显,主要抑制磷酸化p38MAPK蛋白的表达,与I/R组相比SF100、50mg.kg-1组p-p38MAPK蛋白表达显著降低（p<0.05），SB203580+SF100mg.kg-1组效果优于SF100mg.kg-1或SB203580单用组,组间差异有统计学意义（p<0.05）。5. TIMP-1的蛋白表达：假手术未见TIMP-1蛋白的表达，I/R组TIMP-1蛋白表达显著增加；与I/R组相比，SF100mg.kg-1、SB203580以及二者合用组TIMP-1蛋白表达明显增加（p<0.05）。6.MMP-9的蛋白表达：假手术有少量的MMP-9蛋白的表达，I/R组MMP-9蛋白表达显著增加；与I/R组相比，SF100mg.kg-1、SB203580组MMP-9蛋白表达减少（p<0.05），合用组MMP-9蛋白表达显著降低(p<0.05)。7.Fas阳性细胞：与假手术组相比，I/R组Fas蛋白阳性细胞表达明显增高，与I/R组相比各用药组的Fas蛋白阳性细胞数目均减少，阳性率降低（p<0.05）；SF100mg.kg-1与SB203580合用组Fas蛋白阳性细胞数及阳性率较SF100mg.kg-1或SB203580单用组均显著降低（p<0.05）。8.FasL阳性细胞：假手术组未见FasL蛋白阳性细胞表达，与假手术组相比，I/R组FasL蛋白阳性细胞表达显著增高；与I/R组相比各用药组的FasL蛋白阳性细胞数目均减少，阳性率降低（p<0.05）。SF100mg.kg-1与SB203580合用组FasL蛋白阳性细胞数及阳性率较SF100mg.kg-1或SB203580单用组均显著降低（p<0.05）。 结论： 1.局灶性脑缺血再灌注损伤引发神经细胞凋亡，p-p38MAPK蛋白表达增高。 2.阿魏酸钠抑制脑缺血再灌注损伤所致神经细胞的凋亡，下调p-p38MAPK蛋白的表达，提示p38MAPK信号通路可能是其抗脑缺血再灌注损伤的作用靶点。 3.阿魏酸钠分别上调TIMP-1、下调MMP-9、Fas、FasL的蛋白表达，这可能是阿魏酸钠抗脑缺血再灌注损伤的分子机制之一。