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研究背景： 在最新诊断标准下(妊娠24-28周行75g葡萄糖负荷实验(OGTT),75g葡萄糖负荷实验(OGTT)正常值(空腹、服用葡萄糖后1小时、2小时)分别小于5.1mmol/l、10.0mmol/l、8.5mmol/l,其中任何一项异常诊断为妊娠期糖尿病,妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)发病率约1.7–11.6％。过敏性疾病占世界人口10%-30%,而且正以每年大于1%的速度增加,以儿童患者的发病率上升最为明显。 过敏性疾病是机体内的Th1/Th2平衡被打破,而GDM患者比正常孕妇存在着更为明显的Th1细胞因子如IL-2、IFN-γ的下调和Th2细胞因子如IL-10、IL-6、IL-4等的上调,即Th1/Th2比值的下降。同时Th2细胞因子具有调节功能,介导糖尿病妊娠的保护性反应,特别是IL-4与过敏性反应密切。并且相关大量研究证明了成年疾病的胎儿起源学说,胎儿免疫系统在宫内发育过程中可以受到各种不良因素的干扰,高血糖的暴露可能对子代出生后发展为过敏性疾病具有长期的影响。 胰岛素抵抗是妊娠期糖尿病公认的主要发病机制,蛋白激酶C信号传导通道的改变与胰岛素抵抗关系密切,在调控血糖方面有重要作用,澳大利亚免疫学家Ferrante的研究团队于2007年首次发现蛋白激酶Cζ(PKCζ)作为评价过敏风险的新标志物。有学者通过随访妊娠期糖尿病子代过敏性疾病的发生认为妊娠期糖尿病是过敏性疾病的高危暴露因素。目前关于这方面的报道还比较少。 研究目的： 探讨妊娠期糖尿病与子代过敏性疾病的关系,并评价外周血及脐血PKCζ是否可作为婴幼儿早期预测过敏性疾病的指标。 研究对象和方法： 2011年6月-2012年6月在广州市妇女儿童医疗中心产房随机收集40例正常孕妇及40例GDM孕妇外周血及80例孕妇所分娩足月新生儿脐血标本。所有研究对象均为足月单胎,排除妊娠期合并症及并发症,排除过敏性家族史等。标本采集后分别提取RNA。 采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测40例正常孕妇及40例GDM孕妇外周血及80例足月新生儿脐血中PKCζ的mRNA水平,以了解PKCζ在外周血及脐血中的蛋白表达水平。 并对这些新生儿进行随访,调查出生后6个月内湿疹、过敏性鼻炎及哮喘性支气管炎的发生情况。 采用logistic回归分析GDM是否为子代过敏性疾病的暴露因素,并用logistic回归分析PKCζ对过敏性疾病的预测作用。对脐血中PKCζ的水平及孕妇外周血中PKCζ进行相关性分析,并对其它影响过敏性疾病的因素进行分层分析。 结果： 1.孕妇外周血及脐血中PKCζ的含量正常孕妇脐血PKCζ的表达ΔCT值为9.59±0.44,GDM孕妇脐血PKCζ的表达ΔCT值为10.04±0.58,两组数据不符合正态分布(正常组P=0.030,GDM组P=0.005),采用两组独立样本的秩和检验,P=0.002<0.05,差异有统计学意义。GDM孕妇外周血PKCζ的表达ΔCT值为11.64±0.69,正常孕妇外周血PKCζ的表达ΔCT值为10.26±0.89,两组数据不符合正态分布(正常组P=0.005,GDM组P=0.010),采用两组独立样本的秩和检验,P=0.000<0.05,差异有统计学意义。且脐血中PKCζ的表达和孕妇外周血PKCζ表达存在相关性(r=0.504,P=0.000<0.05)。 2.子代过敏性疾病随访情况正常孕妇组子代发生一种或多种过敏性疾病6例,发生率15%,其中湿疹6例,过敏性鼻炎2例,哮喘1例,湿疹合并过敏性鼻炎2例,湿疹合并哮喘1例。GDM孕妇组子代发生一种或多种过敏性疾病24例,发生率60%,其中湿疹20例,过敏性鼻炎6例,哮喘2例,湿疹合并过敏性鼻炎2例,湿疹合并哮喘2例。两组数据进行卡方检验,X2=17.280,P=0.000<0.05,差异有统计学意义。 3.GDM与子代过敏性疾病采用logistic回归分析对两组发生率进行比较,OR=8.500,95%CI为2.905-24.879,P=0.000<0.05,差异有统计学意义,GDM是过敏性疾病发生的高危暴露因素。 4.PKCζ与子代过敏性疾病采用logistic回归分析脐血与孕妇外周血PKCζ对过敏性疾病的预测作用,以健康足月儿脐血PKCζΔCT值均数±标准差为正常值,脐血组PKCζΔCT值>10.02的孕妇有24例,其中18例子代发现一种或多种过敏性疾病,PKCζΔCT值<10.02的孕妇有56例,其中12例子代发现一种或多种过敏性疾病,OR=11.000,95%CI为3.578-33.814,P=0.000<0.05,差异有统计学意义。以正常孕妇外周脐血PKCζΔCT值均数±标准差为正常值,孕妇外周血组PKCζΔCT值>11.12的孕妇有45例,其中22例子代发现一种或多种过敏性疾病,PKCζΔCT值<11.12的孕妇有35例,其中8例子代发现一种或多种过敏性疾病,OR=3.228,95%CI为1.209-8.618,P=0.019<0.05,差异有统计学意义。脐血及孕妇外周血PKCζ对子代过敏性疾病均有预测作用。 5.其它与过敏性疾病正常BMI组与其它BMI各组的过敏性疾病发生率差异均有统计学意义。<18.5组与18.5to≤24.9组,X2=9.981,P=0.002<0.05,差异有统计学意义;25to≤29.9组与18.5to≤24.9组,X2=8.549,P=0.003<0.05,差异有统计学意义;≥30组与18.5to≤24.9组,X2=3.866,P=0.049<0.05,差异有统计学意义。纯母乳喂养与非纯母乳喂养小儿过敏性疾病的发生率差异有统计学意义(X2=4.391,P=0.036<0.05)。正常组与巨大儿组的过敏性疾病发生率有统计学意义,X2=4.431,P=0.035<0.05,差异有统计学意义。 结论： 1.正常孕妇脐血中PKCζ的表达与GDM孕妇脐血中PKCζ的表达有差异;正常孕妇外周血中PKCζ的表达与GDM孕妇外周血中PKCζ的表达亦有差异。脐血中PKCζ的表达和孕妇外周血PKCζ表达存在相关性。 2.正常孕妇与GDM孕妇子代过敏性疾病的发生率存在差异,GDM是过敏性疾病发生的高危暴露因素。 3.脐血及孕妇外周血PKCζ对过敏性疾病均有预测作用。 4.孕妇孕前BMI、小儿出生时的体重及出生后的喂养方式是小儿过敏性疾病发生的影响因素。