麻疼是一种有高度传染性的呼吸道疾病，我国自上世纪60年代初应用减毒活疫苗后发病率显著下降，但每年仍有散发患者在一定范围内流行，甚至引起死亡。因此，提高和改进麻疼快速诊断技术及时掌握麻疼疫情对该病的防控尤为重要。核蛋白（Nudeocapsid N)是麻疼病毒颗粒中含量最多的蛋白，是病毒在繁殖和转录过程中第一个被合成的蛋白，具有较强的抗原活性，是麻疼病毒的主要抗原之一。本实验根据NCBI上公布的麻疼病毒N蛋白基因序列，利用premer5.0设计引物。从含有麻疼抗原全基因序列的质粒中，通过PCR扩增获得目的基因片段，与载体pET-32a(+)分别进行BamH I与;I双酶切，T4DNA连接，再将连接产物转入大肠杆菌感受态细胞E.coli BL21(DE)3,培养过夜后挑取单菌落，在培养物中加入IPTG诱导剂进行诱导表达，表达产物用SDS-PAGE电泳检测，并对表达菌基因组测序，最终成功构建重组质粒，命名为pET-32a (+)/N。之后对诱导表达条件进行优化，确定N蛋白最佳的诱导表达条件为：培养温度37°C, IPTG浓度0.20mmol/L,诱导时间4h。目的蛋白含（H S)标签，便于镍离子亲和层析纯化，结果显示蛋白纯度可达90%。将表达的N蛋白应用于免疫层析胶体金检测试纸条的研制，采用梓檬酸三納还原法，制备出三种不同粒径的胶体金溶液，通过实验蹄选出颗粒直径均一（24nm>性质稳定的胶体金，用它标记麻疼病毒N抗原（标记量26i^g/mL)制备免疫胶体金，用纯化后的N蛋白（1.25mg/mL)和N蛋白多抗（1.0mg/mL)包被于5肖酸纤维素膜（NC)分别作为检测线（T线）和质控线（C线），组装试纸条，进行特异性、灵敏性、重复性和稳定性的验证。实验结果表明，该试纸条具有较好的重复性和稳定性，初步达到了检测麻疼病毒N抗体的要求。