论文部分内容阅读
高温可造成肉鸡体内氧化还原稳态失衡,长期热暴露还可导致肉鸡发生氧化应激。前人研究表明,慢性热应激引起的肉鸡生产性能下降,健康状况受损等现象都与机体氧化应激相关。但有关急性热应激对肉鸡氧化还原状态的影响研究较少,热应激初期肉鸡调控自身氧化还原状态的分子机制仍不完全清楚。本研究选取144只的爱拔益加（AA）肉鸡随机分为4组,每组6个重复,每个重复6只鸡,置于4座环控舱中正常饲养。肉鸡34日龄时,环控舱温度在1小时内分别调整为26（对照组）、29、32和35℃,持续6小时后采集肉鸡血液和肝脏样品。重点关注急性热应激对肉鸡血清生化指标、肝脏抗氧化能力、Nrf2信号通路、内质网应激及细胞凋亡的影响,探究以Nrf2信号通路和UPR反应为核心的抗氧化防御系统在热应激初期的变化规律,揭示肉鸡在应激条件下调控自身氧化还原状态的分子机制。主要结果如下:（1）6小时急性热应激可引起34日龄肉鸡激素分泌增多,热休克蛋白表达上调,血清中抗氧化酶活性升高。高温导致肉鸡处于应激状态,随着环境温度的升高,血清CORT、T3、T4等激素含量逐渐增加（P<0.05）,肝脏中HSP70的基因和蛋白表达量极显著上调（P<0.01）,HSP90的基因和蛋白表达量显著上调（P<0.05）。急性热应激还引起肉鸡血清中H2O2显著增加（P<0.05）,抗氧化酶SOD和CAT的活性显著升高（P<0.05）,小分子抗氧化物质GSH显著减少（P<0.05）。（2）6小时急性热应激可引起34日龄肉鸡肝脏氧化还原状态发生变化,ROS含量增多的同时激活了抗氧化防御系统,提升机体的抗氧化能力。急性热应激条件下,肉鸡肝脏中H2O2和蛋白质氧化产物PC的含量显著增加（P<0.05）,抗氧化酶SOD的活性有升高的趋势（P=0.07）,CAT的活性随着温度升高逐渐升高（P<0.05）,同时GR的活性也显著升高。与血清结果不同的是,高温引起肉鸡肝脏GSH的含量显著增加（P<0.05）。（3）6小时急性热应激可引起34日龄肉鸡肝脏Nrf2信号通路被激活,并启动下游大量抗氧化基因的表达,发挥其保护作用。通过检测肉鸡肝脏中目的基因与蛋白的表达情况发现,在急性热应激条件下,Nrf2及其负责调控的下游抗氧化基因如CAT、SOD1、SOD2、HO-1、NQO1、Prx3、GCLc、GST等的mRNA表达量大都随温度升高而显著上调（P<0.05）,同时肉鸡肝脏中Nrf2和Prx3的蛋白表达水平也随温度升高而显著上调（P<0.05）。（4）6小时急性应激可引起34日龄肉鸡肝脏发生未折叠蛋白反应,缓解内质网应激,阻止细胞凋亡。高温可引起肉鸡肝脏中内质网应激标志物GRP78、GRP94的mRNA表达量和蛋白表达量均显著上调（P<0.05）,进一步引起参与未折叠蛋白反应的PERK、IRE1和XBP1在mRNA水平显著上调（P<0.05）。而抗凋亡因子Bcl-2的mRNA表达水平显著上调（P<0.05）,BAK1、BIK、Caspase-3与Caspase-9等促凋亡因子在各组肉鸡肝脏中无显著变化（P>0.05）。综上,本研究结果表明在热应激初期,肉鸡可通过激活Nrf2信号通路、UPR反应等,调控相关抗氧化基因和具有细胞保护功能的蛋白大量表达,提高抗氧化酶活性,加快谷胱甘肽的合成,提升清除ROS的能力,使肉鸡在急性热应激条件下仍能维持适当的氧化还原状态,以缓解内质网压力,阻止细胞凋亡的发生。