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目的:研究丹参酮对放射引起的大鼠急性肝损伤的保护作用。近年来,三维适形放射治疗(three-dimensional conformal radiotherapy,3DCRT)正广泛应用于临床,为中晚期原发性肝癌(PLC)患者提供了一条新的治疗途径。对不能手术的中晚期PLC患者,提高了PLC局部控制率、生存率和生存质量。在放射治疗的同时,放射性肝病(radiation induced liver disease,RILD)是PLC 3DCRT最主要的并发症之一,也是影响PLC 3DCRT放射耐受量的最主要因素。电离辐射对肝脏损伤主要的并发症是放射性肝炎及其纤维化,但其发生机制尚未完全阐明,放射性肝炎为放射治疗的急性反应,一旦发生,往往不可逆转,因此预防其发生就十分重要。本研究旨在通过实验研究丹参酮是否对放射引起的大鼠肝损伤具有保护作用。
方法:采用河北医科大学医学院动物实验中心提供的健康成年SD大鼠42只,雌雄各半,体重(180±20)g。随机分为正常组(14只)、模型组(14只)、实验组(14只)。实验组于照射前3天起每天给与腹腔注射丹参酮Ⅱ A磺酸钠15mg/kg,照射组和对照组分别同时腹腔注射等量的生理盐水。对模型组、实验组应用医科达加速器6Mv-X线照射上腹部,照射范围:采用1000kv/25mA状态CT下定位,大鼠仰卧于体模固定板上给予乌拉坦麻醉,(25%浓度,500mg/kg),四足固定,上界至膈顶、下界至肝下缘,左右侧界至腹外侧壁,范围约2×4cm,剂量率为1000 cGy/min,源皮照射,计算点深度为3 cm,总剂量20 Gy单次照射的方法造成大鼠急性放射性肝损伤。照射后72小时三组同时处死,应用比色法测定大鼠血清中ALT及测定血清中的MDA的值,应用酶联免疫法测定血清TGF-β1含量,并观察对照三组肝脏大体变化及光镜下病理切片,统计正常组、模型组和实验组的ALT、MDA和TGF-β1数据,对三组之间不同指标的比较,首先进行方差齐性检验。如果方差齐,采用方差分析,两两比较采用LSD法;如果方差不齐,则采用Welch法,两两比较用Dunnett’s法进行分析。
结果:大体肝脏观察可见正常组大鼠肝脏为红褐色,被膜光滑,边缘锐利,质中等。模型组大鼠肝脏肿大,边缘变钝,暗红色或灰红色,质软,有波动感。实验组大鼠肝脏体积轻度增大,暗红色。模型组与正常组相比ALT水平与MDA含量及TGF-β1水平明显增高实验组与模型组相比,应用丹参酮后可明显降低大鼠血浆ALT水平,并降低MDA含量、血清TGF-β1水平。肝脏组织病理损伤得到明显改善,资料采用SPSS10.0软件统计分析对正常组和模型组、正常组和实验组、实验组和模型组的ALT、TGF-β1、MDA的比较,p<0.05,认为差别有统计学意义。正常组大鼠肝组织光镜下观察可见肝小叶结构清楚,肝细胞呈多边形,胞浆丰富,红染,细胞核圆型,染色质淡亮,核仁明显,肝窦大小正常。模型组大鼠肝小叶结构不清,肝板排列紊乱,部分区域肝细胞表现为不同程度的脂肪变性。部分肝窦扩张并伴有明显瘀血。实验组:肝组织结构尚清,肝板排列较为整齐,仍可见部分肝细胞水样变性及脂肪变性,但变性程度和范围较模型组轻和小,也未见明显肝窦扩张、淤血。
模型组和正常组、模型组和实验组间病理比较均有明显差异。
结论:
1.给予单次6-My X线40Gy照射大鼠可引起放射性急性肝损伤。
2.丹参酮对放射引起的大鼠肝损伤具有一定的保护作用。
3.丹参酮对放射引起的大鼠肝损伤的作用机制可能部分来自于其抗氧化活性。