海芋杀虫凝集素基因克隆的研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaopingchina99
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该研究用从海芋块茎中提取的总RNA分别进行3'和5'的RACE—PCR反应,再将其产物经电泳检测和切胶回收纯化后,连接到pMD18-T vector载体上,然后转化到感受态细胞中,提取重组质料,经单双酶切和PCR反应检测成功的质粒则测序.将3'和5'的两端序列进行拼接分析获得全长cDNA序列,推导出凝集素蛋白的AA序列.用网上的相关生物信息学工具进行同源性、保守区域、蛋白质的理化性质、二级结构的分析.另外用不同pH值、不同NaCl浓度的洗脱液进行凝集素粗品的分离.
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