论文部分内容阅读
目的观察超声波和运动疗法对兔实验性骨关节炎软骨细胞凋亡、Bcl-2和MMP-13表达的影响,探讨超声波和运动疗法治疗骨关节炎的机制。方法取健康新西兰大白兔26只,体重2kg左右。随机抽取6只作为正常组,余下20只采用右后膝关节腔内注射木瓜蛋白酶法制作OA模型,随机处死两只验证造模成功。剩余18只随机分为模型组、运动组、超声波组。治疗前予以测定右膝关节活动度。模型组不作处理,笼内自由活动。运动组在减重跑步机上跑步,每日1次,每次30分钟,第1周速度为0、8米／分,第2周速度为1.0米／分,第3周及第4周速度为1.2米／分。超声波组右膝给予水下超声波治疗,频率1KHz,强度500mW/cm2,通断比为20%的超声波治疗,每天1次,每次10分钟,连续4周。所有动物在造模前、治疗前、治疗结束后进行体重及关节活动度测定；治疗结束后行空气栓塞法处死,切开膝关节囊,肉眼观察关节软骨,滑膜和关节液变化情况；取患膝股骨内髁表面软骨和关节囊滑膜,常规固定、包埋、切片,HE染色。TUNE法(脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法)检测软骨细胞凋亡并计算凋亡率,免疫组化法检测Bcl-2及MMP-13的表达。结果1.大体及病理观察显示超声组、运动组关节软骨损伤程度较模型组减轻,且各治疗组双后膝关节活动度较模型组变化小。2.HE染色正常组滑膜无明显炎症表现,模型组滑膜炎症明显,经超声治疗及运动治疗后,滑膜炎症减轻。模型组滑膜评分较正常组高(P<0.05)；超声组、运动组滑膜评分较模型组低(P<0.05)；超声组和运动组无明显差异(P>0.05)。3、TUNEL法检测各组均可见凋亡细胞。模型组凋亡细胞明显增多,与正常组比较有明显差异(P<0.05)；超声组、运动组凋亡率降低,与模型组有明显差异(P<0.05)。运动组与超声组比较差异无显著性。4、Bcl-2免疫组化显示：模型组Bcl-2表达较低,染色较浅,与正常组比较,差异有显著性(P<0.05),超声组、运动组Bcl-2表达明显上升,染色较深,与模型组比较差异有显著性(P<0.05)；运动组与超声组比较差异无显著性。5、MMP-13免疫组化显示：正常组仅在软骨表层有少量MMP-13阳性表达,模型组MMP-13表达明显增高,与正常组比较,差异有显著性(P<0.05)；超声组及运动组MMP-13表达明显下降,与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。运动组与超声组比较差异无显著性。结论1.0A模型中存在Bcl-2表达下降,细胞凋亡增加,MMP-13表达增加。2.运动疗法及超声波可促进Bcl-2表达,降低实验性骨关节炎中升高的软骨细胞凋亡率,抑制软骨细胞凋亡。3.抑制MMP-13的表达,减轻软骨及滑膜炎症,可能运动疗法,超声治疗骨关节炎的机制之一。4.运动疗法、超声波治疗均可促进关节软骨损伤的修复。