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背景和目的:原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)是一组由多种原因引起的肾小球滤过膜通透性增加,导致血浆内大量蛋白质从尿中丢失的临床综合征。血脂代谢紊乱不仅是其典型的临床表现和诊断依据,而且还参与了进行性肾脏损害等病理生理过程,对疾病预后影响重大。低蛋白血症和低血浆胶体渗透压促进肝脏代偿性合成脂蛋白增加,其中分子量较大的组分难以从肾脏排出而蓄积于体内,可能是导致PNS患儿高脂血症(hyperlipidemia,HLP)的主要机制。此外,近年来很多研究还提示PNS发病具有一定的遗传基础,在蛋白尿及HLP的严重程度等方面表现出明显的个体差异。因此,了解PNS患儿血脂代谢紊乱的特点、探讨HLP发生的遗传机制,对于早期阻断慢性肾脏疾病进展、祛除心血管疾病(Cardiovascular Disease,CVD)高危因素、解释疾病易患性、实施个体化治疗、改善患儿预后具有重要的意义。载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)不仅有助于将外周胆固醇(cholesterol,CH)转运至肝脏经代谢清除,而且还可以增加肾小球滤过膜硫酸肝素蛋白多糖的含量,抑制系膜细胞增殖。但apoE基因突变是否会加重PNS患儿肾小球滤过膜损伤,促进尿蛋白排泄和血脂代谢紊乱,尚存在争议。载脂蛋白B(apolipoprotein B,apoB)除了在血脂转运和代谢途径中发挥重要作用以外,还具有较强的刺激巨噬细胞内胆固醇(cholesterol,CH)酯化,促进泡沫细胞形成等作用。然而,apoB基因的遗传变异与PNS患儿血脂代谢紊乱的关系,至今却未见报道。本研究在了解PNS患儿血脂代谢紊乱特点及临床意义的基础上,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chainreaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术结合测序的方法分析apoE和apoB基因多态性,以探讨其对PNS患儿血脂代谢的影响。方法:1.150例PNS患儿和100例健康儿童均空腹12h以上清晨采静脉血,PNS患儿同时收集24h尿液,以甲苯防腐。总胆固醇(totalcholesterol,TC)、甘油三酯(triglyeride,TG)和脂蛋白a(lipoprotein a,LPa)用酶法测定,高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)用选择沉淀法测定,非.高密度脂蛋白胆固醇(nonhigh density lipoprotein-cholesterol,nonHDL-C)等于TC减去HDL-C,LDL-C浓度采用液体双试剂法测定,载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,apoA1)和apoB以免疫比浊法测定。血清总蛋白(total protein,TP)用双缩脲法测定,白蛋白(albumin,A1B)和球蛋白(globulin,GLO)用溴甲酚绿法测定。24h尿蛋白定量(24 hours urine protein,24hUPr)以双缩脲比色法测定。2.PCR-RFLP技术结合测序的方法分析apoE和apoB基因多态性,并根据平衡法计算出各等位基因频率。结果:1.肾病组血清TP、A1B、白蛋白/球蛋白(albumin/globulin,A/G)和apoA1/B显著低于对照组(P＜0.01);而LPa、TC、TG、HDL-C、nonHDL-C、LDL-C、LDL-C/HDL-C和apoB显著高于对照组(P＜0.05)。2.肾病组24hUPr分别与血清TP、A1B及GLO呈显著负相关(P＜0.05)。3.肾病组24hUPr分别与血清LPa、HDL-C及apoA1/B呈显著正相关(P＜0.05);血清TP分别与TC、nonHDL-C、LDL-C、LDL-C/HDL-C及apoA1/B呈显著负相关(P＜0.05);血清A1B分别与LPa、TC、nonHDL-C、LDL-C、LDL-C/HDL-C、apoB及apoA1/B呈显著负相关(P＜0.05);血清GLO分别与TC、nonHDL-C及LDL-C呈显著负相关(P＜0.05);A/G分别与LPa、TC、nonHDL-C、LDL-C、LDL-C/HDL-C、apoB及apoA1/B呈显著负相关(P＜0.05)。4.肾病组共检出apoE 6种基因型,分别为纯合子E2/2 4例(2.67%),E3/3 117例(78.00%),E4/4 5例(3.33%),杂合子E3/2 13例(8.67%),E4/2 5例(3.33%),E4/3 6例(4.00%);根据平衡法算出等位基因e2频率为8.67%,e3频率为84.33%,e4频率为7.00%。对照组共检出5种基因型,分别为纯合子E3/3 73例(73.00%),E4/4 5例(5.00%),杂合子E3/2 15例(15.00%),E4/2 1例(1.00%),E4/3 6例(6.00%);根据平衡法算出等位基因e2频率为8.00%,e3频率83.50%,e4频率为8.50%。肾病组和对照组apoE吾基因型及等位基因频率分布未见显著差异(P＞0.05)。5.健康儿童和PNS患儿apoE不同基因型及等位基因间各项血脂指标均未见明显差异(P＞0.05)。6.肾病组检出apoB基因Xba I位点3种基因型,分别为X-/X-132例(88.00%),X+/X-17例(11.33%),X+/X+1例(0.67%);等位基因X-频率为93.67%,X+频率为6.33%。对照组检出X-/X-95例(95.00%),X+/X-5例(5.00%),未发现X+/X+基因型;等位基因X-频率为97.50%,X+频率为2.50%。肾病组和对照组Xba I位点各基因型及等位基因频率分布未见显著差异(P＞0.05)。7.肾病组检出apoB基因EcoR I位点3种基因型,分别为E-/E-15例(10.00%),E+/E-17例(11.33%),E+/E+118例(78.67%);等位基因E-频率为15.67%,E+频率为84.33%。对照组检出E-/E-8例(8.00%),E+/E-13例(13.00%),E+/E+79例(79.00%);等位基因E-频率为14.50%,E+频率为85.50%。肾病组和对照组EcoR I位点各基因型及等位基因频率分布未见显著差异(P＞0.05)。8.肾病组检出apoB基因Msp I位点3种基因型,分别为M-/M-1例(0.67%),M+/M-12例(8.00%),M+/M+137例(91.33%);等位基因M-频率为4.67%,M+频率为95.33%。对照组检出M+/M-2例(2.00%),M+/M+98例(98.00%),未发现M-/M-基因型;等位基因M-频率为1.00%,M+频率为99.00%。肾病组和对照组Msp I位点各基因型及等位基因频率分布未见显著差异(P＞0.05)。9.携带等位基因X+的健康儿童和PNS患儿血清LPa、TC、nonHDL-C、LDL-C、LDL-C/HDL-C及apoB浓度明显高于X-者(P＜0.05),而apoA1/B则显著降低(P＜0.01)。10.E-/E-可显著升高健康儿童血清LPa、TC、HDL-C及apoA1浓度(P＜0.05),携带等位基因E-的健康儿童血清LPa、TC及.HDL-C浓度显著高于携带E+者(P＜0.05);携带等位基因E-的PNS患儿血清LPa浓度明显高于E+者(P＜0.05)。11.PNS患儿apoB基因Msp I位点不同等位基因间各项血脂指标均未见明显差异(P＞0.05)。结论:1.PNS患儿存在明显的血脂代谢紊乱。大量蛋白尿可能是PNS患儿继发血脂代谢紊乱的主要原因。2.apoE和apoB基因Xba I、EcoR I和Msp I位点各基因型和等位基因在人群中分布存在一定程度的地域差异。3.apoE各基因型及等位基因分布在健康儿童及PNS患儿间无统计学差异,且PNS患儿apoE不同基因型及等位基因间各项血脂指标亦未见明显差异。4.apoB基因Xba I、EcoR I和Msp I位点各基因型及等位基因在肾病组和对照组儿童之间的分布无显著性差异。apoB等位基因X+和E-可能会增加PNS患儿继发HLP易患性。对于携带X+和E-的患儿应注意监测血脂状况,尽早调整饮食,必要时加用降脂药物。