【摘 要】
：
目的:探讨NGF对SF/CS支架复合BMSCs对兔膝关节骨软骨缺损的修复效果。方法:1.通过真空干燥、化学交联制备SF/CS支架,观察支架的大体外观及扫描电镜和HE染色观察支架的内部结构;2.通过密度梯度离心、贴壁筛选分离培养BMSCs,加载到SF/CS支架上,用成骨分化培养基培养和成软骨分化培养基分别培养,以普通培养基为对照组,通过茜素红S染色和COL1a1免疫组化染色鉴定成骨效果;通过Alci
【基金项目】
：
遵义市科学技术联合科技研发基金[遵市科合社字（2018）184号; 国家自然科学基金（81660367）; 贵州省科学技术基金[黔科合基础（2016）1420号]
论文部分内容阅读
目的:探讨NGF对SF/CS支架复合BMSCs对兔膝关节骨软骨缺损的修复效果。方法:1.通过真空干燥、化学交联制备SF/CS支架,观察支架的大体外观及扫描电镜和HE染色观察支架的内部结构;2.通过密度梯度离心、贴壁筛选分离培养BMSCs,加载到SF/CS支架上,用成骨分化培养基培养和成软骨分化培养基分别培养,以普通培养基为对照组,通过茜素红S染色和COL1a1免疫组化染色鉴定成骨效果;通过Alcian blue染色和COL2a1免疫组化染色鉴定成软骨效果;3.用NGF浓度分别为0 ng/m L、10 ng/m L、100 ng/m L、200 ng/m L普通培养基连续培养SF/CS支架上的BMSCs,共培养8天,用CCK8法观察不同浓度的NGF对SF/CS支架上BMSCs增殖的影响;4.用含NGF浓度为0 ng/m L、10 ng/m L、100 ng/m L、200 ng/m L软骨分化培养基培养SF/CS支架上的BMSCs,RT-q PCR检测AGG、SOX9、COL2a1基因m RNA表达,Western Blot检测COL2a1、AGG表达;5.通过复乳溶剂挥发法将NGF制备成缓释微球,分别用光镜及电子显微镜观察NGF缓释微球的外观,马尔文径粒仪测定NGF缓释微球的径粒大小,Elisa检测缓释微球液中NGF的浓度,计算包埋率、载药率及缓释效果,PC12细胞检测缓释微球中包埋NGF的生物活性;6.将NGF缓释微球、SF/CS支架、BMSCs制备成NGF-SF/CS-BMSCs复合体,植入兔膝关节骨软骨缺损模型中,对照组不加NGF缓释微球,空白组为单纯SF/CS支架,分别于4周、8周、12周从影像学、大体标本、病理染色观察关节骨软骨的修复效果,用ICRS评分和改良Wakitani评分评估软骨修复状况,并分析可能的修复机制。结果:1.通过真空干燥、化学交联制备的SF/CS支架具有疏松多孔的结构,支架壁厚薄均一,内部各腔室相互连通;2.分离培养的BMSCs可以在体外大量扩增,在成骨培养基条件下可以定向分化为成骨细胞表达COL1a1和钙结节;在成软骨培养基条件下可以定向分化为软骨细胞表达COL2a1和软骨基质;3.不同浓度的NGF普通培养基对SF/CS支架上的BMSCs增殖测定的OD值无统计学差异;4.含不同浓度NGF的软骨分化培养基诱导SF/CS支架上的BMSCs定向软骨细胞分化,AGG、SOX9、COL2a1基因m RNA表达量无统计学差异,分泌的COL2a1、AGG蛋白表达量无统计学差异。5.制备的NGF缓释微球包埋率为31.15%,载药率为31.36%,90天NGF缓释总量达到90.49%,缓释微球释放的NGF可使PC12细胞分化为神经样细胞;6.加入缓释微球的NGF-SF/CS-BMSCs组与未加入缓释微球的SF/CSBMSCs组及SF/CS组比较,NGF-SF/CS-BMSCs组对兔膝关节软骨缺损修复ICRS评分更高,改良Wakitani评分更低。结论:1.SF/CS支架与BMSCs可以作为良好的组织工程材料,制备的载NGF缓释微球有较好的缓释效果及生物活性;2.NGF对SF/CS支架上BMSCs增殖以及分化后的软骨细胞表达COL2a1、AGG无促进或抑制作用;3.与SF/CS-BMSCs组和SF/CS组比较,NGF-SF/CS-BMSCs组对兔膝关节骨软骨缺损有更好的修复效果,可能与早期促进软骨下骨的修复有关。
其他文献
贾德逊舞蹈剧场在20世纪60年代初,由一群致力于挑战音乐会舞蹈传统的舞者、艺术家和音乐家发起。他们的实验行为引起极大的震撼,就像一枚重磅炸弹投入现代舞蹈界。本文介绍了贾德逊舞蹈剧场的起源,即纽约默斯·坎宁汉工作室的编导课,继而讲述贾德逊舞蹈剧场自然运动的各种试验,以及随后几代人进一步发展后现代舞蹈的历程。
《中华人民共和国禁毒法》颁布和实施以来,接受社区戒毒的吸毒人员越来越多,伴之而来的戒毒人员康复及回归社会给社区工作带来了的较大压力和挑战。作为家庭、社会等领域的重要角色扮演者,吸毒人员的问题都具有影响范围广、复杂程度高、伤害程度深等特点,其戒毒康复、家庭关系修复和重新回归社会等都需要引起社区的高度关注。就当前戒毒康复工作而言,我国在社区戒毒康复与推进戒毒人员回归社会中仍存在诸多问题,如社区戒毒和社
＜正＞《中共中央关于党的百年奋斗重大成就和历史经验的决议》指出：“习近平新时代中国特色社会主义思想是当代中国马克思主义、二十一世纪马克思主义，是中华文化和中国精神的时代精华，实现了马克思主义中国化新的飞跃。”这三句话不是随意地排列，而是有着严谨的内在逻辑。第一句话体现了习近平新时代中国特色社会主义思想的“马克思主义性”，第二句话体现了习近平新时代中国特色社会主义思想的“中国性”或“民族性”，
目的:阐明Cdk5介导Drp1蛋白调控线粒体功能在糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy,DR）中的作用机制;探究Drp1抑制剂Mdivi-1及Cdk5抑制剂Roscovitine通过调控线粒体功能影响糖尿病视网膜病变血管闭塞情况。方法:1.在探讨Drp1蛋白在DR线粒体功能障碍相关作用的研究中:（1）HRMECs分组后分别处于正常葡萄糖（5.5m M）、高渗组（5.5m M葡
为切实缓解在校大学生在应用网络交易App中遭遇欺诈等问题，我们专门研究了综合性的校园二手交易平台“拾物”App。该App可以把大学生的闲置物品流通起来，同时也有平台的保障，相对于立足于社区的传统二手交易平台，“拾物”App更具有安全性、便利性、社交性等，贯彻了绿色、低碳发展理念，具有一定的核心竞争力。
在移动互联网快速发展的背景下,手机预约、药品售卖智能化、药品外卖配送服务等带给了生活许多便利。我国人口老龄化程度进一步加深,老年用户逐步增长,老年人由于身体机能衰退,认知能力退化等原因,在使用上存在着一系列问题,但目前还没有专门针对老年人的购药类App。因此,本文在社会背景和现实需求上具有研究的可行性和实用性。本文从探讨目前已有的老年人App和购药类App出发,总结老年人使用上存在的问题及面临的挑
名著《红楼梦》塑造人物角色之丰富多彩,堪称中国文学作品之最。该书不仅刻画了贾宝玉、林黛玉、王熙凤等众多经典人物,同时展现贾母和刘姥姥两位老者的形象亦是生动传神。贾母和刘姥姥命运截然不同,生活条件更是天壤之别。二者在中国文学作品的众多女性形象之中有着独特璀璨的闪光点,本文将进行贾母和刘姥姥的分析对比,更好地解读二者形象。
价格歧视是一种常见的定价形式，在经济分析中价格歧视并没有褒贬之分，是一个中性的概念，因为在经济活动中正确运用价格歧视可以在一定程度上提高整个社会的资源配置效率，减少社会福利的净损失。因此，本文从价格歧视的角度出发，分析价格歧视的基本概念类型、研究互联网零售中价格歧视的作用机制，并就互联网零售中实行价格歧视策略提出了一些建议。
＜正＞随着互联网技术深入应用到企业财务管理工作中，对于企业财务管理工作实效提升带来的影响较为明显。大数据时代，企业财务管理工作中使用到各种类型的金融工具，在提升财务管理工作实效的同时，也带来了较大的财务管理风险，全面做好财务风险预警工作更为关键。本文从大数据时代做好企业财务风险预警工作的重要性分析入手，研究了大数据时代的企业财务风险预警工作存在的突出问题，并针对性提出了提升大数据时代的企业财务风险
从重型燃气轮机涡轮叶片的研制发展史出发，综述了用于重型燃气轮机涡轮叶片高温合金材料的典型化学成分、叶片制备工艺技术、冷却技术和热障涂层设计。通过分析重型燃气轮机涡轮叶片服役特点，总结了重型燃气轮机用高温合金材料的设计原则。结合国内外燃气轮机涡轮叶片关键成型技术的发展和现状，归纳总结了涡轮叶片的研制工艺难点，并对未来燃气轮机涡轮叶片发展和制造工艺革新进行了展望。