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荧光分析法具有反应迅速、稳定性高、选择性好、试剂量少、灵敏度高以及方法简单等优点,因此被化学工作者作为一种重要且有效的分析手段而应用。近几十年来,荧光分析法的发展十分迅速,在无机离子、环境分析、有机物以及药物、生物大分子的分析及检测中应用非常广泛。 本文以荧光分析法对腺嘌呤、壳聚糖以及肝素钠的含量进行测定,主要工作如下: 1.吖啶黄荧光光度法测定腺嘌呤 碱性条件下,痕量腺嘌呤使得吖啶黄在激发波长为454nm,发射波长为509nm处的荧光强度明显增强,从而建立了新的测定痕量腺嘌呤的荧光光度法。文中讨论了缓冲介质、酸度、缓冲溶液体积、荧光染料吖啶黄的用量以及反应时间等各种条件对实验的影响。在最佳条件下,方法的线性范围为0.2~3.0×10-4g/L,检出限为1.83×10-5g/L,方法用于维生素B4片剂和核酸水解产物中腺嘌呤的测定,回收率为98.4~104.4%。 2.核固红荧光猝灭法测定壳聚糖含量 在pH3.8的醋酸-醋酸钠缓冲介质中,壳聚糖对核固红的荧光强度有明显的猝灭作用,且在一定浓度范围内,壳聚糖的质量浓度与荧光猝灭程度呈线性关系,据此建立了荧光猝灭法测定壳聚糖含量的新方法。文中讨论了缓冲介质、酸度、缓冲溶液体积、荧光染料吖啶黄的用量以及反应时间等各种条件对实验的影响。在最佳条件下,按实验方法做出方法的线性范围为0.008~2.5mg/L,检出限为5.398ng/L。对猝灭机理进行了初步探讨,并将方法用于保健食品中壳聚糖含量的测定,回收率高,结果满意。 3.藏红O荧光猝灭法测定肝素钠含量 在pH5.02的B-R缓冲介质中,肝素钠对藏红O的荧光强度有明显的猝灭作用,且在一定浓度范围内,肝素钠的质量浓度与藏红O的荧光猝灭程度呈现良好的线性关系,据此建立了一种简便、快速、灵敏的测定肝素钠的新方法。在最佳条件下,此方法的线性范围为0.008~0.8ng/mL,检出限为3.28ng/mL。在文中初步地讨论了肝素钠猝灭藏红O的猝灭机理,并将此法用于肝素钠注射液中肝素钠效价的测定,结果满意。