HPLC法同步测定饲料中脂溶性维生素

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通过实验研究,本论文建立了用高效液相色谱法同步测定饲料中4种脂溶性维生素5种形态化合物的方法。本方法以饲料为基质,以维生素K<,3>、维生素A乙酸酯、维生素D<,3>、维生素E、维生素E乙酸酯为目标对象进行分析。与传统皂化法不同的是,本实验使用了一种商品名为Savinase的酶破坏维生素表面的包被物质而使维生素游离出来,然后用无水乙醇提取这些游离的维生素。在酶解的过程中,使用了0.2%的氨水溶液为维生素K<,3>从其常用的商品剂型呈水溶性的亚硫酸氢钠甲萘醌中游离出来,解决了饲料中的维生素K<,3>与其他脂溶性维生素同步提取的问题。经酶解处理过的样品液在固相萃取小柱净化后,上机。维生素经配有保护柱的Atlantis dC18色谱柱分离,以甲醇和水(98:2,v/v)为流动相洗脱,并以1.0 mL/min的流速经紫外-可见光检测器在230 nm和265 nm处检测,16分钟内完成分离过程,方法的检测限为2.0-42.0 mg/kg,回收率为87-130%,变异系数小于10%。本方法最大的优点是快速、操作简便,使用了弱毒性的乙醇作萃取剂并适用于维生素添加剂、多维、预混料等饲料中脂溶性维生素的检测。
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