中药仙鹤复方有效部位群及其抗肿瘤作用研究

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本文遵循“有效成分组是采用现代各种分离手段获得的能够保持原中药复方临床疗效的不可继续分割的分子集合体”的研究思路,结合实践体会,认为有效部位是中药复方药效物质基础研究的核心问题,对有效部位深入细致的研究,将为实现中医药理论从药味配伍向化学成分配伍的发展奠定基础。 本课题选用仙鹤草、白花蛇舌草、白英和甘草四味药材组成的经临床验证疗效确切的中药仙鹤复方为研究对象,以抗肿瘤效果为评价指标分离分析复方抗肿瘤有效部位总多糖、总萜类、总黄酮、总鞣质。以浸膏得率和有效部位含量为指标,建立了中药仙鹤复方的提取工艺条件;以水提醇沉法提取复方总多糖,并对多糖进行脱脂纯化;以萃取法分离得到总鞣质;建立了聚酰胺柱层析分离复方总黄酮的工艺条件;研究比较了分离纯化复方总黄酮和总萜类多种型号树脂,筛选出SP825大孔吸附树脂具有良好的纯化效果,其纯化分离的工艺条件为:上样方法为湿法上样,洗脱溶媒为50%乙醇。用SP825大孔吸附树脂柱分离总黄酮和总萜类,总黄酮主要集中在正丁醇萃取层,可用50%乙醇洗脱;总萜类主要集中在乙酸乙酯萃取层,可用50%乙醇洗脱。测定了复方提取物的LD50,考察其急性毒性;建立小鼠荷H22肝癌模型,验证了复方提取物、复配物和多糖的抗肿瘤作用。 本文明确了中药仙鹤复方的有效部位,并对其进行了提取分离、定性鉴别、含量测定、毒理和药效等方面的研究,研究结果表明总多糖、总鞣质、总黄酮、总萜类的提取分离方案可行,这四个有效部位是中药仙鹤复方抗肿瘤作用的主要物质基础。
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