多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因检测及同源性分析

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:deathzdw
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[目 的]鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)是一种专性需氧、无动力、氧化酶阴性的非发酵糖革兰阴性杆菌,目前已发展成为医院感染最常见的机会性病原体之一,广泛分布于空气、水、土壤等自然环境和病房、护士站、医生办公室等医院环境中,极易引起医院获得性肺炎、尿路感染、败血症等严重甚至致死性感染,尤其是在重症监护病房。近年来,由于广谱抗生素的广泛使用以及侵入性诊疗技术的广泛开展,鲍曼不动杆菌的检出率不断上升,同时抗菌药物敏感性不断下降,多重耐药菌株日益剧增,并且存在严重的克隆播散现象,如何控制和治疗多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)感染已成为临床亟待解决的问题。本研究旨在收集昆明医科大学附属延安医院(以下简称我院)多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布及耐药数据,描述相关耐药基因携带情况,并通过分子流行病学调查明确菌株间亲缘关系,从而提供可靠和及时的流行病学资料,指导临床制定合理有效的用药策略,提高患者治愈率,为医院制定有力的感染防控措施,控制鲍曼不动杆菌的暴发流行提供实验室依据。[方法]收集昆明医科大学附属延安医院检验科微生物室2017年9月至2018年12月分离得到的100株非重复多重耐药鲍曼不动杆菌,通过VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行鉴定后,采用MIC法和K-B法检测鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的敏感性,应用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法扩增7种β-内酰胺酶耐药基因(SHV、TEM、IMP、VIM、ADC、OXA-23、OXA-58),同时采用多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)方法对随机选取的38株多重耐药鲍曼不动杆菌进行分子分型,分析菌株同源性关系。[结果](1)菌株临床分布:100株多重耐药鲍曼不动杆菌主要来源于神经外科,占40%,其次为重症医学科,占23%,呼吸内科占18%,心脏外科ICU、康复科、普外科及骨科分别占5%、4%、3%、3%;标本类型以痰标本(59%)和肺泡灌洗液(33%)为主,伤口分泌物占4%,血液、尿液、脑脊液及胸水标本各占1%。(2)菌株耐药分布:100株多重耐药鲍曼不动杆菌对所检测抗生素耐药程度均较高,对青霉素类、单环β-内酰胺类、头孢菌素类和碳青霉烯类抗菌药物的耐药率高达100%;在β-内酰胺酶抑制剂中,除头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为87%外,其余β-内酰胺酶抑制剂的耐药率均为100%;对庆大霉素、左氧氟沙星的耐药率分别高达96%、94%;对妥布霉素、复方新诺明、阿米卡星的耐药率均为91%;米诺环素的耐药率也超过50%,并且具有较高中介率;仅对替加环素具有良好的敏感性,耐药率为0%。(3)耐药基因分布:100株多重耐药鲍曼不动杆菌中,TEM基因检出率最高,共94株阳性,其次是OXA-23基因,占92%,82株携带ADC基因(82%),未检出 SHV、IMP、VIM、OXA-58 基因。75 株同时携带 TEM+ADC+OXA-23基因,14株携带TEM+OXA-23基因,携带TEM+ADC基因4株,携带ADC+OXA-23基因2株,单独TEM、ADC、OXA-23基因阳性各有1株,另有2株上述7种基因检测结果皆为阴性。(4)同源性分析:将38株多重耐药鲍曼不动杆菌测序结果提交到Pubmlst数据库进行比对,结果共分为5个序列型,其中一半以上是ST208型(55.3%),为优势型别,其次为ST1145型,占31.5%,ST540型、ST195型和ST1696型各有2株、2株、1株,分别占5.3%、5.3%和2.6%。ST208型在重症医学科、神经外科、呼吸内科、胸外科、心脏外科、神经内科均有分布,ST1145型亦在神经外科、重症医学科、呼吸内科、普外科、康复科和肾脏内科均有检出。[结 论](1)我院多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布范围广泛,主要分布于神经外科和重症医学科,临床上主要引起患者呼吸道感染。(2)本院临床分离鲍曼不动杆菌耐药形势严峻,对各种类型抗生素普遍耐药,少数菌株对头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素具有敏感性,全部菌株对替加环素无耐药产生,提示替加环素作为鲍曼不动杆菌感染的治疗药物具有广泛应用前景。(3)携带TEM、ADC和OXA-23基因是我院鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因,而同时携带TEM+ADC+OXA-23基因是鲍曼不动杆菌产生多重耐药最主要的耐药模式。(4)ST208型是我院最常见的序列型,ST208型和ST1145型在医院各个科室间广泛分布,存在耐药菌株的克隆传播。
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