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异甘草素（Isoliquiritigenin，ISL）是甘草中的一种异黄酮化合物，它有着很强的药理活性，具有抗肿瘤、抗病毒、抗自由基、松弛血管、抑制脂质过氧化等生物活性。近年来研究表明，异甘草素对多种肿瘤均具有明显的抑制作用，还尚未报道异甘草素对人类淋巴细胞性白血病CCRF-CEM细胞、人前列腺癌PC-3细胞的研究。本文选取人类淋巴细胞性白血病CCRF-CEM细胞、人前列腺癌PC-3细胞等肿瘤细胞，研究异甘草素对这几种细胞的体外抗肿瘤活性，探讨和揭示异甘草素抑制肿瘤的机制，为异甘草素抗肿瘤新药的研制提供一定的科学依据。采用MTT法测定细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期，激光共聚焦和DNA ladder检测细胞凋亡，琼脂糖凝胶电泳和原子力显微镜检验异甘草素体外对DNA的氧化破坏作用，探讨和揭示异甘草素抗肿瘤可能的机制。研究结果如下：1．异甘草素对CEM、PC-3和A549肿瘤细胞有较好的抑制效果异甘草素对CEM、PC-3和A549细胞半数抑制浓度IC50分别为18.38μM、46.8μM、24.55μM，表明异甘草素对这几种肿瘤细胞有较好的抑制效果。2．异甘草素对CEM和PC-3细胞增殖抑制效果随着药物浓度的增加和药物作用时间的延长而加强应用倒置显微镜观察异甘草素对CEM和PC-3细胞增殖的影响，异甘草素处理过的CEM细胞与对照组细胞相比细胞数量减少，少见团状的细胞克隆，可见细胞分生速度减慢；加入不同浓度异甘草素处理之后，PC-3细胞内颗粒增多，细胞的界线变得模糊，浓度较高异甘草素处理则使多数细胞由多边形变成椭圆形或者圆形，细胞伸展不良，从培养瓶底部游离，结果表明异甘草素对CEM和PC-3细胞增殖都有较好的抑制作用，并且抑制效果随着药物浓度的增加和药物作用时间的延长而加强。3．异甘草素可以引起CEM细胞G2／M期阻滞，并且细胞周期阻滞具有时间和浓度依赖性应用流式细胞仪检测异甘草素对CEM和PC-3细胞周期的影响，25μM异甘草素作用CEM细胞48小时G2／M期为22.84％，明显高于正常对照细胞的7.77％。异甘草素可以引起PC-3细胞小碎片的增多，G0／G1期，S期和G2／M期细胞均会减少。结果表明异甘草素可以引起CEM细胞G2／M期阻滞，并且细胞周期阻滞具有时间和浓度依赖性。4．异甘草素可以诱导CEM、PC-3细胞内的CD95含量升高来促进细胞凋亡40μM异甘草素处理CEM细胞24小时，CD95抗体表达率为51.47％，明显高于正常对照细胞44.62％；40μM异甘草素处理CEM细胞24小时，CD147抗体表达率为68.74％，明显低于正常对照细胞52.34％。100μM异甘草素处理PC-3细胞24小时CD95表达率为31.58％，略高于正常对照细胞30.33％；100μM异甘草素处理PC-3细胞24小时CD147表达率为44.08％，明显高于正常对照细胞的32.74％。结果表明异甘草素可以诱导CEM细胞内的CD95含量升高来促进细胞凋亡，诱导CEM细胞内的CD147含量降低从而减轻肿瘤的浸润、转移；对PC-3细胞异甘草素可以诱导细胞内的CD95含量升高来促进细胞凋亡，诱导PC—3细胞内的CD147含量升高促进了肿瘤的浸润、转移。5．异甘草素对CEM和PC-3细胞的凋亡作用较弱应用DNA Ladder和激光共聚焦检测结果表明：较高浓度异甘草素（100μM）作用CEM和PC-3细胞，只是看到出现弥散的DNA条带，并未出现细胞凋亡典型的梯状条带。结果说明异甘草素对CEM和PC-3细胞的凋亡作用并不明显。6．异甘草素在铜离子协同作用下对质粒DNA有破坏作用琼脂糖凝胶电泳和原子力显微镜结果显示，质粒DNA在铜离子和异甘草素单独作用下均不会对质粒造成损伤，而异甘草素在铜离子协同作用下，会对DNA造成损伤。正常质粒DNA形状规则，很少有断裂现象；而异甘草素在铜离子协同作用下，DNA则会出现不同程度的断裂。结果表明异甘草素作为黄酮类物质具有抗氧化性，但在金属离子的作用下则表现出了氧化性，成为了氧化增强剂，造成DNA的损伤。综上所述，异甘草素对人类淋巴细胞性自血病CCRF-CEM细胞、人前列腺癌PC-3细胞体外增殖有明显的抑制作用；异甘草素可以引起PC-3细胞小碎片的增多，G0／G1期，S期和G2／M期细胞均会减少，可以引起CEM细胞G2／M期阻滞，并且细胞周期阻滞具有时间和浓度依赖性；异甘草素可以诱导CEM和PC—3细胞凋亡；异甘草素在铜离子的作用下可以造成DNA的损伤；以上研究可以为异甘草素抗肿瘤新药的研制提供一定的科学依据。