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外源基因转入植物基因组后,能否在受体植物中稳定表达和遗传是转基因植物能否商品化的首要条件,这就需要不断观察和检测转基因植株及后代的遗传表现。本试验选用继代保存12年的转CpTI基因苹果组培苗和定植4-6年的田间转基因植株,研究外源基因在受体植株中是否稳定存在;调查了转基因植株的花粉和果实特性;对转基因植株杂交F1代果实进行种胚培养,研究了外源基因在转基因苹果杂种后代的遗传分离规律。主要研究结果如下:1对继代培养保存12年的嘎拉、王林、乔纳金、富士品种59个株系转CpTI基因苹果组培苗分别进行卡那霉素筛选和PCR检测,结果表明:59个株系均可扩增出CpTI特异基因片断;除王林2个转化株系部分单株组培苗在50 mg/L卡那霉素筛选时出现白化,表现卡那霉素敏感外,其余转基因株系组培苗均表现出卡那霉素抗性,说明外源nptⅡ和CpTI基因可以在长期保存的继代组培苗中稳定存在。2对定植46年的田间转化植株的叶片、根系、花粉、果实进行外源基因PCR检测,结果表明:嘎拉、王林和富士品种所测转化株系叶片和根系中、嘎拉品种花粉与果实中CpTI基因均稳定存在;而嘎拉品种极少部分株系的根系、花粉和果实中未检测到CpTI基因,说明CpTI基因可以在生殖器官稳定存在,并具有遗传给后代的能力。3外源基因导入后对转基因植株的花粉数量及活力均有影响,不同转基因嘎拉株系每枚花药的平均花粉量、花粉离体萌发率及花粉活力区别很大,且有显著低于非转基因对照的趋势。4以转基因嘎拉苹果与未转化富士苹果进行杂交,采收果实种子进行种胚培养,确定了适宜苹果种胚离体培养条件为:种子在8℃左右低温下休眠4周,经25℃左右催芽处理,发芽后的种子用0.1%升汞溶液消毒8-10min,接种于培养基上获得杂交株系。5对转基因苹果与非转基因苹果分别做父、母本得到的杂交后代进行卡那霉素筛选和PCR检测,卡那霉素抗性植株与卡那霉素敏感植株在F1代植株中表现为1:1分离,证实nptⅡ标记基因为一显性杂合基因,可通过有性繁殖在转基因后代植株中稳定遗传;杂交后代PCR检测表明卡那霉素抗性苗含有的nptⅡ和CpTI基因紧密连锁,在转基因植株杂交后代未发生分离。