甲乙煎抑制基质金属蛋白酶在肝癌组织中的表达及抗转移作用的实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SURE181709394
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目的:观察甲乙煎对肝癌H22模型小鼠癌细胞侵袭和转移情况的影响,并进一步探讨其作用机理,重点探讨甲乙煎对肝癌组织基质金属蛋白酶表达的影响,以更好地为临床提供客观而科学的依据。方法1动物分组清洁级雄性BALB/C小鼠75只,5—6周龄,体重18±2g,随机分为5组:病理模型对照组,西药(5-Fu)对照组,甲乙煎小、中、大剂量组,每组各15只。2复制小鼠肝癌H22淋巴道转移模型复苏后的肝癌H22瘤株,注入5-6周龄BALB/C小鼠腹腔内,待7-10天后,小鼠腹围增至最大时,抽取腹水,传代2-3次。之后,将腹围增至最大时的荷瘤小鼠,颈椎脱臼法处死,腹腔内注射无菌生理盐水5ml,再用一次性灭菌注射器抽取腹水。将收集的腹水经800转/分离心3分钟,弃上清,计数,调整细胞浓度至108/ml,于各组小鼠左后肢爪垫内侧皮下注射瘤细胞悬液0. 05mI ( 5×10~6个/ml)。3给药自造模第2天开始给药。病理模型对照组以生理盐水0.4 m1/只·天灌胃;西药(5-Fu)对照组以5-Fu 2mg/ml,0. 2m1/只·天腹腔注射;甲乙煎小、中、大剂量组分别以甲乙煎lg/ml、2g/ml、4g/ml,0.4 m1/只·天灌胃,每日一次,连续15天。4取材及固定实验结束后第2天,将各组小鼠颈椎脱臼法处死,称体重,取腘窝、髂动脉旁、肾门淋巴结、脾及胸腺,并称重。取各组小鼠左足爪垫皮下局部瘤组织,避开坏死和出血区,立即入4%多聚甲醛,固定12小时后,常规脱水,透明,石蜡包埋。超薄切片机切片,片厚5μm,,烘箱内烘干备用。结果1甲乙煎治疗组与模型组相比,其淋巴结指数有降低趋势,其中小剂量组有显著性差异(P<0.05);大、中剂量组可使胸腺指数明显升高(P<0.05)。西药5-Fu治疗组与病理模型对照组相比较,脾指数明显降低(P<0.01),而中药各治疗组则无此副作用(P>0.05)。2中药各治疗组可明显降低肝癌组织基质金属蛋白酶(MMP2、MMP9、TIMP2)的表达水平。结论1甲乙煎可明显降低腘窝淋巴结、髂动脉旁淋巴结和肾门淋巴结的重量,降低淋巴结指数,减轻淋巴结的转移程度,以甲乙煎小剂量组最为明显。2各治疗组可明显提高肝癌小鼠胸腺指数,以甲乙煎大剂量组最为明显;与病理模型组相比较,西药对照组明显抑制脾指数,而甲乙煎各治疗组则无此副作用。3甲乙煎可抑制肝癌组织MMP-2、MMP-9的表达水平,同时提高肝癌组织TIMP-2的表达水平,从而抑制肝癌细胞的转移,改善其预后。其作用以甲乙煎大剂量组较为明显,在一定范围内呈量效关系,即剂量增加,作用增强。
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