论文部分内容阅读
羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)是内源性胆固醇合成的关键酶，在维持胆固醇稳态方面具有重要的作用。本试验以朗德鹅和天府肉鹅为研究对象，对鹅HMGR基因进行序列分析，探讨鹅HMGR基因催化区域的活化位点的结构特征；使用RT—PCR方法研究鹅HMGR基因的表达特性，以及填饲对HMGR基因表达的影响和可能机理。研究结果表明：1．本试验获得了朗德鹅和天府肉鹅HMGR基因催化区部分序列424bp，此段序列在两品种鹅中完全相同，鹅与鸭子、鸡、人、老鼠、仓鼠HMGR基因mRNA序列同原性分别约为96％、92％、72％、74％、74％，鹅与鸭和鸡的氨基酸序列同源性相同都为97％。编码活化位点谷氨酸的核苷酸序列在鸡、鸭、鹅、人、老鼠和仓鼠中完全一致。对鹅与鸭和鸡HMGR基因cDNA相应部分序列进行多态分析，共检测到35个可变位点，其中都为两个变异的单碱基变异多态位点，核苷酸多样度(Nucleotide diversity)为0.05582。2．朗德鹅和天府肉鹅HMGR基因在肝脏、腹脂、肠、皮脂和肌肉中都有表达，但是在肝脏中的表达量最高，表明鹅同鸡和人一样，胆固醇合成主要是在肝脏中，而不是在脂肪组织。3．填饲引起鹅血浆中Insulin、Glu和CH浓度的显著变化，但存在品种差异。填饲组中，天府肉鹅血浆中Insulin浓度和CH浓度显著高于朗德鹅。天府肉鹅和朗德鹅肝脏HMGR基因mRNA丰度与血浆中胰岛素水平呈显著正相关(r=0.583，P＜0.05；r=0.597，P＜0.05)、与血浆中游离胆固醇水平呈显著负相关(r=-0.559，P＜0.05；r=-0.562，P＜0.05)，说明胰岛素和胆固醇对肝脏HMGR基因的表达有较大的影响。4．填饲显著降低朗德鹅、天府肉鹅肝中HMGR mRNA丰度，对天府肉鹅的下调节效应大于朗德鹅。HMGR mRNA表达的下调可能与胰岛素、葡萄糖和游离胆固醇综合调节的作用有关。