为研究肝肠联合脏器移植的免疫反应规律，探讨手术技术的可行性和两个脏器间的彼此作用。我们采用Wistar→SD种系组合，利用显微外科技术构建大鼠肝／小肠联合移植模型，摸索模型制作的技术要点，观察术后受体及移植物生存情况，并与单独肝移植和小肠移植模型进行比较。分别在术后5、7、14天获取移植物标本，观察分析移植物浸润细胞组织学改变以及排斥反应强度，用TUNEL法检测移植物细胞凋亡，利用半定量PCR方法分析移植物穿孔素／颗粒酶B的表达，通过免疫组织化学染色检测移植物Fas／FasL表达，并观察雷公藤多甙对肝肠联合移植后免疫反应的影响。 在造模过程中共进行大鼠肝肠联合移植手术103次，技术稳定后手术成功率达到63.15％。其中70％以上受体获得长期存活(>28天)，同期所行肝移植受体全部获得长期存活，小肠移植受体则在20天内死于排斥反应；组织学检查显示，术后5天移植小肠出现排斥反应，术后7天，单独小肠移植组移植物出现中-重度排斥反应，联合移植组移植小肠排斥较术后5天加重，但比单独小肠移植轻，至术后14天，肝肠联合移植组移植小肠病理改变开始消失；术后7天移植肝脏汇管区有炎胞浸润，14天加重，肝肠联合移植组和单独肝移植组之间无明显差异；术后移植肝和小肠都出现细胞凋亡，肝肠联合移植组移植小肠凋亡细胞较单独小肠移植组明显减少；单独小肠移植组移植小肠颗粒酶／穿孔素表达较肝肠联合移植组高：联合移植组移植小肠FasL表达较单独小肠移植组高。在移植肝脏，术后14天FasL表达较术后7天高，而联合移植组与单独肝移植组无明显差别；给以雷公藤多甙可使术后7天联合移植组移植小肠浸润细胞减少，术后14天移植肝脏浸润细胞也减少。 研究结论：(1)大鼠肝肠联合移植模型是一个比较稳定的模型，其制作成功有赖于精巧的显微外科操作和细致的围术期处理；(2)大鼠肝／小肠联合整块移植手术与临床术式相近，可以满足临床前研究的需要；(3)肝／小肠联合整块移植可保证两个移植物的同源性，且移植物血运符合生理要求，是研究肝肠联合移植后免疫反应规律的理想模型；(4)采用Wistar→SD大鼠种系组合行肝／小肠联合移植，移植物可被自然接受；(5)肝肠联合移植后免疫耐受的 天津医科大学博士研究主学位论文 中文摘要 形成涉及淋巴系统活化，是一种主动调节过程：（6）移植后实质细胞凋亡与排 斥反应强度紧密相关；（7）穿孔素顺粒酶作为CTL活化的重要标志可以敏感地 反映m＋CTL的活性，与排斥反应的强度密切相关：侣）在耐受形成过程中， 移植物Fas卜表达明显上调，提示机体可能通过这一机制调节免疫反应仰雷公 藤多贰抑制淋巴细胞活化，减轻排斥反应，有利于耐受诱导状态。