Compound K诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡的研究

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目的本文通过研究CK在卵巢癌细胞中的作用,阐述其作用机制,为日后临床化疗药物的研发及应用提供理论指导。方法1、应用MTT方法检测CK抑制卵巢癌细胞CAOV3增殖的作用,并测定其半数抑制浓度IC50值;2、利用荧光显微镜观察细胞形态学变化;3、应用免疫印迹分析法(Weston blot方法)检测Caspase-3特异性底物PARP的断裂情况;4、体外检测酶活结果测定细胞凋亡关键酶Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9的活性。结果1、CK显著抑制卵巢癌细胞CAOV3增殖,并呈量-效关系,其半数抑制浓度IC50值为3.6μg/ml。2、加入CK诱导的卵巢癌细胞CAOV3在荧光显微镜下出现了细胞凋亡特有的形态特征,如细胞变圆、膜发泡、细胞核固缩和断裂。3、通过免疫印迹法分析发现,CK的作用浓度为2.5μg/ml、5μg/ml时,Caspase-3特异性底物PARP发生明显断裂,5μg/ml为甚。4、Caspase活性检测方法检测到Caspase-3, Caspase-8, Caspase-9被激活,说明CK通过Caspase-8激活的膜受体途径和Caspase-9激活的线粒体途径来完成细胞凋亡。结论1、CK对人卵巢癌细胞CAOV3具有细胞毒性作用;2、这种作用是通过细胞凋亡实现的;3、细胞凋亡包括Caspase-8激活的膜受体途径和Caspase-9激活的线粒体途径。
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