苹果UV-B光受体基因MdUVR8的克隆及功能鉴定

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UVR8是一类能够特异性感受环境中紫外光B(UV-B)的光受体,植物通过其接受UV-B光信号,调控生长发育过程中的各个方面。UVR8已经被证明广泛存在于高等植物、藻类以及苔藓中,在拟南芥的研究中证明UVR8能够调控植物的光形态建成过程。同样,光在果树的形态建成中也具有重要作用,其中蓝光受体隐花色素基因CRY在苹果中的功能已被鉴定,但是UVR8的相关研究在果树中研究较少。本研究克隆得到一个苹果UV-B光受体基因MdUVR8,并对其基因结构特点、表达特异性及其在植物体内的功能等进行了分析和鉴定。主要研究工作与结果如下:1.用RACE法克隆得到苹果的UV-B光受体基因MdUVR8,该基因的cDNA全长为1957bp,其中ORF区域为1539bp,编码一条含512个氨基酸的多肽,分子量为48.8kDa。通过氨基酸序列分析表明,MdUVR8与AtUVR8具有保守的蛋白质结构域,都含7个重复的RCC1结构域。2.荧光定量RT-PCR分析表明,MdUVR8在苹果的各组织和器官中为组成型表达;且该基因的表达受UV-B光信号诱导,暗示MdUVR8基因参与苹果的光响应。3.功能互补试验结果表明,MdUVR8能部分恢复拟南芥uvr8突变体中的发育缺陷及光形态建成;在野生型拟南芥中过表达MdUVR8,能强化光形态表型,表示组成型表达的MdUVR8参与植物光形态建成。4.酵母双杂交及免疫共沉淀实验证明,MdUVR8能够和苹果MdCOP1蛋白进行互作,为进一步研究苹果中光信号转导的分子机制指明了方向。
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