酵母双杂交筛选结核分枝杆菌异柠檬酸裂合酶的相互作用蛋白

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本文采用酵母双杂交技术从人肝脏eDNA库中筛选与ICL相互作用的蛋白。将克隆的结核分枝杆菌icl构建到BD载体,自激活检测通过后,和AD库共转酵母细胞,LacZ检测后,抽提酵母质粒,转化大肠杆菌,所抽质粒分别同BD空载和重组BD共转酵母细胞,通过X-Gal检测后测序并在数据库中比对鉴定。结果所筛阳性克隆为145个,4个通过验证,其中3个均为补体成分C3的C末端片段。C3作为补体系统的关键组分,为该系统的3条途径所共有。对ICL和C3的相互作用的研究将有助于理解并揭示结核分枝杆菌与免疫系统的关系,为新的抗结核药物的开发提供新的思路。
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