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miRNA是一类内源性且具有调控功能的小分子非编码RNA，可以与靶基因3’非翻译区进行碱基配对结合来降解mRNA或者抑制其翻译。研究发现精子中的RNAs，尤其是miRNAs、tsRNA、以及 siRNAs 对合子基因的转换、表观重编程、受精胚胎发育以及其后代表型等都有着重要的影响。本研究根据本课题组前期构建的牛成熟精子、MII期卵母细胞和牛成纤维细胞的miRNAs文库，结合相关文献和生物信息学分析，初步筛选出精子高表达的miR-183，预测其可能是对早期胚胎发育起重要作用的一个miRNA。通过单细胞q-PCR方法精确验证miR-183在精子中高表达。对miR-183的靶基因进行生物信息学方法分析，并通过双荧光素酶实验和q-PCR确定了其在细胞骨架调控和凋亡通路上的靶基因：EZRIN、PPP2CA和PDCD6。将miR-183 inhibitor mimic、control mimic通过显微注射的方法注入受精卵原核期胚胎，发现miR-183 inhibitor组原核期纺锤体正常率较对照组显著降低（57.10% vs 76.07%，P＜0.05)，且囊胚率、囊胚细胞数显著低于对照组(30.33% vs 37.33%；106.6vs 115.2，P＜0.05)。对注射后体外受精各时期胚胎进行q-PCR，发现从原核期一直到4-细胞期，miR-183 inhibitor组的EZRIN、PPP2CA、PDCD6的基因表达水平显高于NC组，证明了miR-183对靶基因的调控作用持续到4-细胞时期；对各组囊胚凋亡率进行分析，发现miR-183 inhibitor组的囊胚凋亡率显著高于对照组（8.2% vs 4.8%，P＜0.05)。 综上所述，通过生物信息学方法结合分子水平上验证，找到miR-183在受精后胚胎中的靶基因：EZRIN、PPP2CA、PDCD6。通过功能缺失实验发现 miR-183对受精后胚胎的纺锤体形成、囊胚发育及胚胎质量具有显著影响。