论文部分内容阅读
薏苡(Coix Lacryma-jobi L.)属于禾本科(Graminae)玉米族(Tripasacea)薏苡属(Coix),为1年生或多年生草本植物[1]。薏苡在我国的分布较广,是传统的粮药兼用作物,同时又是一种新型的饲用作物,具有很高的经济价值。本实验对薏苡的再生体系进行研究,以期为今后功能基因的遗传转化和薏苡的诱变育种奠定基础。本研究以栽培薏苡(YY17)和野生薏苡(YY1、YY9)为研究对象,采取间接器官发生方式获得了栽培薏苡的离体再生植株。以薏苡种子、胚、下胚轴、节间、叶片、根尖、茎、气生根、芽为外植体,研究了五种不同浓度2,4-D对薏苡愈伤组织诱导的影响,水解酪蛋白、脯氨酸、谷氨酰胺、甘露醇、维生素C、硫酸铜和硝酸银对愈伤组织增值的影响,6-BA、NAA、KT、TDZ、2,4-D和GA3组成的十八种分化培养基对再生的影响,选择出适宜的外植体和合适的培养基,建立了YY17的体外再生体系,并获得了YY17的离体再生植株。结论如下:1.YY1和YY9种子用75%酒精消毒后再用8%次氯酸钠分别消毒15 min、10 min即可获得无菌种子。YY17种子用8%次氯酸钠和0.1%升汞消毒均不能完全获得无菌种子。2.获得一种简便获取无菌芽的方法:YY1和YY9种子直接浸泡在1%双氧水中;YY17先用8%次氯酸钠消毒10 min,再浸泡在1%双氧水中,发出的芽即为无菌芽。3.培养愈伤组织过程中,YY1、YY9和YY17芽可形成紧凑的胚性愈伤组织,YY1、YY9和YY17三种材料的叶片不能形成愈伤组织。其余外植体材料诱导出的愈伤组织为白色或淡黄色棉花状,水渍化严重的非胚性愈伤,继代培养褐化严重。愈伤组织诱导效果最好的为以芽为外植体,并搭配MS+1mg/L2,4-D+1mg/LNAA的培养基。4.硝酸银可以改善薏苡愈伤组织的状态和减轻愈伤组织的褐化。愈伤组织继代培养基为MS+1mg/L2,4-D+1mg/LNAA+0.85mg/LAg NO3。5.将YY1和YY9芽诱导出的愈伤组织,置于不同再分化培养基上培养30d,仅分化出绿点和愈伤量的持续增加,没有芽的分化。YY17芽诱导出的愈伤组织接种在添加有2mg/L6-BA+2mg/LKT的MS培养基上,培养3周左右即诱导出芽。6.YY17再生芽在添加0.5mg/LIBA的1/2MS培养基上培养一周左右即可生根,最后形成完整的植株。