论文部分内容阅读
胰岛素刺激GLUT4从GSVs转位到细胞膜上，是血糖控制的关键事件。因此，刺激GLUT4上膜的化合物，可用于发展成新一代高效治疗糖尿病的药物。在本项目中，我们采用了新型PH敏感的荧光探针，IRAP-mOrange2。该探针可通过检测荧光变化，方便、实时、定量地反映GLUT4上膜。利用该探针，在L6细胞中我们建立并优化了GLUT4上膜激动剂的高通量筛选模型(Z＞0.35)，并在64，000的化合物库中筛选得到一个候选化合物，星形孢菌素。在L6细胞中，该化合物可以刺激GLUT4上膜以及糖吸收。通过初步的机理探索，我们发现该化合物以浓度和时间依赖的方式使AMPK磷酸化，AMPK的抑制剂，CompoundC可以阻断该化合物诱导的GLUT4上膜以及糖吸收。这表明星形孢菌素可能是通过AMPK途径发挥促进GLUT4上膜的作用。我们的工作不仅建立了基于新型探针的糖尿病高通量药物筛选模型，而且找到一个具有潜在治疗糖尿病价值的先导化合物。