DMP对蚯蚓(Eisenia fetida)的毒性效应及蛋白质组学分析

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采用滤纸接触法和自然土壤法,研究邻苯二甲酸二甲酯(DMP)对蚯蚓Eisenia fetida)的毒性效应,并以蛋白质组学双向电泳和质谱分析技术,研究了DMP污染土壤中生长的蚯蚓表皮组织细胞蛋白质的表达差异,对差异表达的蛋白质进行鉴定与定量,初步筛选出了与DMP污染土壤的生态毒性相关的生物标记物。主要研究结果如下:1.采用滤纸接触法和自然土壤法,研究DMP对蚯蚓(Eisenia fetida)的毒性效应。滤纸接触法24h,48h的LCso分别为140.305μg/cm2,130.662μg/cm2;自然土壤法7d,14d的LCso分别为2124.066mg/kg,1356.745mg/kg, DMP污染浓度为600mg/kg时,污染暴露21d,蚯蚓体重抑制率达21.93%。2.在DMP污染浓度分别为200mg/kg,600mg/kg的自然土壤中污染胁迫7d,14d,21d,采用蛋白质双向电泳技术筛选出差异表达140个蛋白质斑点,结合肽质量指纹图谱技术和数据库比对法初步鉴定出5种差异蛋白质,分别为假定蛋白(BRAFLCRAFT58397),α微管蛋白(alpha tubulin),ATP合酶p亚基(ATP synthase beta subunit),p微管蛋白(beta tubulin),假定蛋白(FAEPRAM21203570),有望成为土壤生态毒性评价、监测和开展毒理学研究的生物大分子标记物。3.利用HPLC检测DMP在新鲜鼠肝匀浆中的代谢,对Ln(C)-t作线性回归,得到回归曲线:Ln(C)=-0.20251t+7.32206, R2=0.9673,速率常数:Kb=0.20251min-1,半衰期1,2=3.421min,其生物降解速率符合一级动力学模型。
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