集约化养殖业的发展产生大量的畜禽粪便污染。堆肥处理资源化利用畜禽粪便是常用的方法。传统的自然发酵存在着发酵周期长,产品的肥效低。通过向有机废弃物中接种促腐剂可以提高发酵效率,缩短发酵时间。但是,在有机肥的实际生产中发现一些问题:冬季(温度低于10℃)有机肥生产严重受阻,生产周期延长,有机肥质量下降,严重制约了冬季有机肥的生产;同时经研究发现由畜禽粪便发酵制备的有机肥料中主要存在雌激素等一些有害物质,这些物质对环境和人类健康危害严重。为了解决有机肥冬季生产的问题和降低有机肥中的雌激素等一些有害物质。本文针对这两个问题进行了研究,主要研究内容和结果:采用低温诱导方法,从牛粪中筛选出一株低温(5～10℃)下快速繁殖的细菌D4,堆肥接种D4的单菌剂,低温(5～10℃)发酵中起温到25℃只需24h。同时利用纤维素酶活对比方法,从牛粪堆肥样品中共计筛选到具有纤维素酶活的细菌20株,真菌3株,其中高产纤维素酶活为的细菌X2和X3,真菌Z1。从牛鼻栓分离到的20株内生菌中,筛选到1株真菌NX7,在7d内降解浓度为10mg/L的雌激素E2的效率达到76.2%。研究这些功能菌株之间相互关系发现D4、X2、X3、Z1和NX7相互之间不发生拮抗。采用生理生化鉴定和16SrDNA序列测定方法鉴定了 3株细菌的归属种类,结果鉴定D4为假单胞菌属腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens),X2和X3为假单胞菌属弯曲假单胞菌种(Pseudomonas geniculata)。采用形态学和分子学鉴定方法,真菌Z1鉴定为根霉属黑根霉(Rhizopus nigricans),菌株NX7为拟盘多毛孢属(Pestalotiopsissp.)。利用D4、X2、X3和Z1四株功能菌株,制备低温型促腐剂和常温型腐熟剂(不含D4菌株)。研究了低温促腐剂的制备方法,保证了促腐剂中活菌数量达到国家有机物料腐熟剂产品技术标准有效活菌数0.50X 108cfu/g以上。在泗洪县谷丰有机肥厂设计处理10吨量的畜禽粪便的堆肥实验,测定每天的温度变化,同时测定成品有机肥水分、C/N变化和种子发芽率。测定结果是低温型促腐剂在低温5-10℃下,堆肥发酵升温速度明显,同一批次的有机肥生产能提前5d完成,且有机质颗粒密度细,水分降低较快,C/N变化显著;同时发现添加促腐剂比未添加促腐剂的堆肥发酵,产品水分低,种子发芽率高。研究了菌株NX7降解雌激素(E2)的活性:发现加入Ca2+、Ba2+、Zn+ Cu2+、Cr2+和Pb-2+的培养液中,E2的降解率分别为86.7%、82.2%、83.8%、83.4%、0.330%和0。测定NX7菌株在168h时间内E2的降解率与NX7产生的漆酶活性存在关联。NX7菌株能有效降解有机肥中的雌激素(E2),分别使用SP[E固相提取有机肥中雌激素(E2)和利用重组基因酵母方法检测发现菌株NX7在7d时间内对有机肥中E2的降解率为820%。本文从功能菌种的筛选鉴定,到研究菌株间相互关系,再到制备增温型腐熟剂进行堆肥实验,和研究菌株NX7降解有机肥中E2的活性。通过一系列的实验结果和实际生产应用结果表明,证明筛选的功能菌株和生产的促腐剂具有良好的应用前景。