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目的：通过间断皮下注射尼古丁制作改良尼古丁依赖-戒断大鼠模型。方法：SD大鼠30只,随机分成5组,每组6只,为正常对照组(Control组)、生理盐水组(NS组)、尼古丁3mg/kg/d组(NT3组)、尼古丁9mg/kg/d;且(NT9组)和尼古丁18mg/kg/d组(NT18组),分别不注射、生理盐水、尼古丁1mg/kg、3mg/kg(?)6mg/kg皮下注射,3次/d,连续7d。于第7d末次注射后60min皮下注射美加明1mg/kg。观察大鼠注射尼古丁期间和戒断后体重变化、存活情况和尼古丁戒断评分。结果：与NT3组比较,注射尼古丁后第7d,NT9组和NT18组大鼠体重增加缓慢(3.8±1.3g,2±0.3g vs7.2±1.0g)(P<0.05),戒断后第1d和第2d大鼠体重增加迅速(P<0.01),NT9组和NT18组大鼠美加明激发后出现更多的戒断症状(P<0.01),但NT18组大鼠死亡率达17%。结论：间断皮下注射尼古丁9mg/kg/d连续7d可以成功制作改良尼古丁依赖-戒断大鼠模型。目的：观察尼古丁戒断后和尼古丁戒断切口痛大鼠术后足底机械刺激缩足阈值(MWT)和热刺激缩足潜伏期(TWL)的变化。方法：SD大鼠30只,随机分为5组。①正常对照组(Control组,n=6)：大鼠在正常条件下饲养7d,不给予任何处理；②生理盐水对照组(NS组,n=6)：大鼠在正常条件下饲养,分别于每天5：00,13：00和21：00时经皮下注射生理盐水,每次0.1ml,3次/d,连续7d；③尼古丁戒断组(NT组,n=6)：大鼠在正常条件下饲养,分别于上述3个时间点经皮下注射尼古丁每次3mg,3次/d,连续7d；④切口痛组(IP组,n=6)：大鼠在正常条件下饲养7d后于右后肢足底做切口痛模型；⑤尼古丁戒断切口痛组(NT+IP组,n=6)：大鼠在正常条件下饲养,分别于每天上述3个时间点经皮下注射尼古丁每次3mg,3次/d,连续7d,第7d注射尼古丁后于右后肢足底做切口痛模型。对Control组、NS组和NT组大鼠分别于第8d测量右下肢足底MWT和TWL的变化,连续7d；对IP组和NT+IP组大鼠分别于第8d测量下肢术侧和健侧足底MWT和TWL的变化,连续7d。结果：1.尼古丁戒断对大鼠疼痛行为学的影响(1)尼古丁戒断对大鼠MWT变化与Control组相比,NT组大鼠在尼古丁戒断后1-7d足底MWT明显降低(P<0.01)。组内比较,NT组大鼠在戒断后1d和2d MWT降低更为显著(P<0.01)。(2)尼古丁戒断对大鼠TWL的影响与Control组相比,NT组大鼠在尼古丁戒断后1-7d足底TWL明显降低(P<0.01)。组内比较,NT组大鼠在戒断后第4d TWL降低更为显著(P<0.01)2.尼古丁戒断对切口痛大鼠疼痛行为学的影响(1)尼古丁戒断对切口痛大鼠MWT的影响与IP组大鼠术侧相比,IP+NT组大鼠术侧MWT在术后1-7d明显降低(P<0.05)；与IP组大鼠术侧相比,IP组大鼠健侧足底MWT在术后1-4d明显升高(P<0.05),术后第5-7d MWT没有差异(P>0.05)；与IP组大鼠健侧相比,IP+NT组大鼠健侧在第1-7d MWT明显降低(P<0.05)。(2)尼古丁戒断对切口痛大鼠TWL的影响与IP组大鼠术侧相比,IP+NT组大鼠术侧足底TWL在术后1-7d明显降低(P<0.05)；与IP组大鼠术侧相比,IP组大鼠健侧足底TWL在术后1-6d明显升高(P<0.05)；与IP组大鼠健侧相比,IP+NT组大鼠健侧足底TWL在术后1、2、3、5和6d明显降低(P<0.05)。结论：1.尼古丁戒断可以引起大鼠疼痛敏感性增高。2.尼古丁戒断可以引起切口痛大鼠痛觉敏感性增高,这与临床上吸烟患者术后阿片类药物需要量增加相一致,为进一步研究其发生机制奠定了基础。目的：探讨脊髓小胶质细胞在尼古丁戒断切口痛大鼠术后痛觉过敏中的作用。方法：SD大鼠42只随机分为3组。①单纯切口痛组(IP组,n=18)：根据处死取材时间再分为3个亚组,每组6只。大鼠正常条件下饲养,于右下肢足底做切口痛模型,术后第1、2、3、5、7d对大鼠右下肢足底进行MWT和TWL的测定；②尼古丁戒断切口痛组(NT+IP组,n=18)：根据处死取材时间再分为3个亚组,每组6只。大鼠在正常条件下饲养,于每天5：00,13：00和21：00时皮下注射尼古丁3mg/kg,3次/d,连续7d。第7d注射尼古丁后于大鼠右下肢足底做切口痛模型,于术后第1、2、3、5、7d对右下肢足底进行MWT和TWL的测定；③米诺环素组(M组,n=6)：同N+IP组,于大鼠做切口痛模型前1h腹腔内注射米诺环素100mg/kg。然后分别于术后第1、2、3、5、7d对大鼠右下肢足底进行MWT和TWL的测定。IP组和NT+IP组大鼠术后第1d痛行为学测试后处死取材；第2、3d分别测试痛行为学,于第3d处死取材；第5、7d分别测试痛行为学,于第7d处死取材。取脊髓腰膨大L4-6段,通过免疫组织化学方法测定IBA-1标记的阳性细胞的表达情况和数量。结果：1.腹腔内注射米诺环素对尼古丁戒断切口痛大鼠疼痛行为学的影响(1)与IP组比较,NT+IP组大鼠在术后1、2、3、5、7d MWT均显著降低(P<0.01)；与NT+IP组比较,M组大鼠在切口前1h腹腔内注射米诺环素100Omg/kg,在术后第1d MWT明显升高(28.12±1.36g vs22.34±2.37g)(P<0.01),而第2、3、5、7d没有变化(P>0.05)。(2)与IP组比较,NT+IP组大鼠在术后1、2、3、5、7d TWL均显著降低(P<0.01)；与NT+IP组比较,M组大鼠在切口前1d腹腔内注射米诺环素100mg/kg,术后第1d TWL明显升高(7.54±1.26s vs5.16±1.16s)(P<0.01),而第2、3、5、7d没有变化(P>0.05)。2.IBA-1标记的活化小胶质细胞的变化通过免疫组织化学由IBA-1标记的活化小胶质细胞表现为细胞内棕褐色的标记物。主要密集分布在脊髓背角第Ⅰ、Ⅱ板层。组内比较,IP组大鼠脊髓背角IBA-1阳性细胞术后第3d比术后第1d和第7d明显增多(P<0.01)。与IP组比较,在术后第1d NT+IP组大鼠IBA-1阳性细胞明显增多(P<0.01),在术后第3d和第7d NT+IP组大鼠IBA-1阳性细胞也增多(P<0.01)。结论：尼古丁依赖-戒断引起大鼠脊髓背角小胶质细胞活化,小胶质细胞活化参与了尼古丁戒断切口痛大鼠术后痛觉过敏的形成。目的：探讨切口周围组织中IL-1β在尼古丁戒断切口痛大鼠术后痛觉过敏中的作用。方法：SD大鼠96只,随机分成4组：①正常对照组(Naive组,n=6),在正常条件下饲养,不做任何处理；②尼古丁戒断组(NT组,n=30),大鼠在正常条件下饲养,于每天5：00,13：00和21：00时皮下注射尼古丁3mg/kg,3次/d,连续7d。③切口痛组(IP组,n=30),大鼠在正常条件下饲养7d后,根据Brennan等方法制作大鼠切口痛模型；④尼古丁戒断切口痛组(NT+IP组,n=30),大鼠在正常条件下饲养,于每天5：00,13：00和21：00时皮下注射尼古丁3mg/kg,3次/d,连续7d。于第7d末根据Brennan等方法制作大鼠切口痛模型。NT组、IP组和NT+IP组大鼠按术前2h、术后2h、术后24h、术后48h和术后72h再分为5个亚组,每个亚组6只。分别于术后2h、24h、48h和72h进行疼痛行为学测试；于术前2h、术后2h、24h、48h和72h处死大鼠,取材皮肤切口周围皮肤组织,通过ELISA法检测大鼠皮肤组织中IL-1β的含量。结果：1.尼古丁戒断切口痛大鼠疼痛行为学变化(1)尼古丁戒断切口痛大鼠足底MWT的变化与Naive组大鼠相比,IP组大鼠从术后2h开始,其MWT开始下降(P<0.05),至术后第48hMWT达最低(P<0.01),到术后第72h开始好转。与IP组相比,NT+IP组术后2h、24h、48h、72h其MWT显著降低(P<0.05),以术后48hMWT降低最为显著(P<0.01)。(2)尼古丁戒断切口痛大鼠足底TWL的变化与Naive组大鼠比较,IP组大鼠术后2h TWL开始下降(P<0.05),至术后48h TWL达最低值(P<0.01),到术后第72h开始好转。与IP组比较,NT+IP组术后2h和24hTWL虽然降低,但没有统计学意义,术后48h和72h TWL明显缩短(P<0.05),以术后48hTWL缩短最为显著(P<0.01)。2.尼古丁戒断切口痛大鼠切口周围皮肤组织中IL-1β的变化与IP组术前2h(11.52±0.35pg/mg)比较,NT组大鼠在各时间点切口周围组织中IL-1β水平明显增高(P<0.01),IP组大鼠术后各时间点均明显升高(P<0.01),从术后2h(44.28±6.27pg/mg)开始升高,术后48h (111.83±8.24pg/mg)达高峰,术后72h开始回降。与IP组各时间点比较,NT+IP组大鼠在相应时间点切口周围组织中IL-1β水平明显增高(P<0.01)。与术前2h(19.69±1.86pg/mg), NT+IP组大鼠切口周围组织中IL-1β水平在术后各时间点均明显升高(P<0.01),从术后2h(62.18±3.74pg/mg)开始开始升高,术后48h(129.47±6.26pg/mg)达高峰,术后72h开始回降。结论：1.尼古丁戒断可以引起切口痛大鼠术后痛觉敏感性增高,以术后48h为最显著。2.尼古丁依赖-戒断可以引起切口皮肤周期组织IL-1β水平升高,IL-1β参与了尼古丁戒断切口痛大鼠术后痛觉过敏的形成。