核酸功能化丝素材料调控细胞黏附行为的研究

来源 :湖南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:juwenfeng163
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细胞黏附的程度和强度及随后的细胞增殖和分化,在很大程度上取决于生物材料界面的物理和化学性质。构建具有细胞选择性黏附的界面功能化通常是通过化学偶联多肽或抗体等蛋白质等方法实现。其材料的制备方法往往具有一定的繁复,灵活性不强。水凝胶因其在生物医学材料、化妆品和生物传感器领域的广泛应用而备受关注。本研究基于丝素水凝胶材料,通过多巴胺共价修饰方法构建核酸适配体功能化的丝素水凝胶材料界面,实现具有细胞选择性的黏附调控。本文通过核磁共振氢谱以及傅里叶红外氢谱表征方法,验证水凝胶材料的成功合成以及多巴胺修饰对水凝胶结构的影响;进一步,通过流变学分析和溶胀率的实验,发展优化丝素水凝胶的强度和吸水率的方法;然后,通过荧光成像证实连接子(Linker)寡核苷酸链通过点击化学方法共价连接到多巴胺修饰的水凝胶上;最后,应用连接子的序列互补链,将具有特异性识别特定细胞膜表面蛋白(c-Met/Ep CAM/MUC1)的核酸适配体偶联到水凝胶上,通过细胞黏附实验证明该界面对多种靶细胞(SL1/SYL3C/MUC1)的选择性捕获和黏附性能。值得注意的是,我们所构建的水凝胶功能化平台具有多能性,可以通过合理设计Linker的碱基配对序列,通过选择性偶联特定的或者多个不同适配体,实现对细胞膜受体的二聚或者寡聚调控,精确干预细胞行为。综上,本文提出一种新型核酸适配体功能化水凝胶的构建策略,可以作为选择性增强生物材料和细胞间相互作用(细胞黏附、细胞迁移和极化调控)的通用平台。该方法通过对基于核酸适配体的分子识别模块的特异性和价态进行精确控制,实现基于界面的高选择性、高精度细胞行为操控,有望进一步应用于组织工程和再生医学等领域。
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