猪传染性胃肠炎病毒在低血清培养基驯化的PK-15细胞中增殖规律观察

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ilytotti
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)是一种高度接触性传播的急性肠道病毒,两周龄内仔猪感染伴有严重腹泻,脱水,呕吐等症状,死亡率极高。该病暂无特异性药物或有效的治疗方法,其防控主要以注射疫苗为主。目前大部分相关疫苗生产厂家采用PK-15细胞增殖TGEV来制造TGEV疫苗。牛血清作为PK-15细胞增殖培养中的重要营养物质来源,通常用量达到培养基的10%左右,但牛血清价格昂贵,且每批次血清会随着提供的血清牛的个体差异变化而变化,从而影响细胞的生长,而不同品质的血清培养的细胞质量差异较大;其次,血清的成分复杂,含细胞毒性物质及抑制成分也会影响细胞的生长;牛血清中携带血源性细菌、支原体等病原生物增加了污染细胞的风险。本研究从血清市场及疫苗制造的实际情况出发,经过低血清培养基驯化培养PK-15细胞,以常规培养基组(10%FBS)为对照组,低血清培养基组(2%FBS)为试验组,分别选用两种不同培养基增殖培养TGEV,观察计算病毒TCID50,建立TGEV qRT-PCR检测方法测定不同培养基中细胞内外病毒增殖含量。结果显示,低血清培养基中TGEV的病毒效价并未受到影响,感染组24h后细胞内、48 h后细胞外病毒含量有所提升且明显高于对照组,表明本试验所驯化的PK-15细胞可用于TGEV的增殖。应用流式细胞仪检测两种培养基中TGEV感染PK-15细胞前后凋亡率,结果显示,低血清培养体系中虽然血清浓度降低,但其存在的代替血清功效的物质同血清一样具有延缓细胞凋亡的作用,不会因为血清含量降低而加快诱导细胞凋亡;TGEV感染PK-15细胞后,凋亡率均随时间增长逐渐上升,表明两种培养基中TGEV都能够显著诱导PK-15细胞发生凋亡,但在72 h两组数据差异显著,证明低血清培养基对TGEV诱导PK-15细胞产生凋亡有一定的影响,具体如何影响还有待进一步研究;通过建立的细胞凋亡相关基因Bcl-xL、Mcl-1及Puma qRT-PCR检测方法对两种培养基中TGEV感染PK-15细胞前后Bcl-xL、Mcl-1及Puma mRNA转录水平进行检测,证实了低血清培养基对细胞凋亡基因的转录有一定的影响,从而影响细胞凋亡的发生,然而究竟是以何种方式对其进行调控的,还有待进一步研究。
其他文献
<正>【裁判要旨】当投保人同时是驾驶人员驾车发生交通事故后逃逸,事后自首并赔偿受害人的情况下,保险公司是否应当支付交强险理赔金,现有法律法规并无明确的适用依据。对于
目的分析脑胶质瘤发病的危险因素,并评估危险因素控制后其发病率的变化趋势,为该病的一级预防提供证据。方法收集国内外有关脑胶质瘤危险因素的病例对照研究,筛选出主要危险
上个世纪50年代,美国政府逐渐实施地方政府绩效评估,将其应用于政府管理。由此,各地地方政府都把政府绩效的提升作为主要目标。为了实现这一目标,政府的绩效评估体系不断发展
目的:探讨糖尿病并发脑梗死患者的下肢动脉病变B超诊断价值。方法:选取2016年7月—2017年7月我院收治的糖尿病并发脑梗死患者74例作为观察组研究对象,另选取同期来我院进行健
目的前列腺癌是危害全世界男性健康的重大疾病之一,其发病率逐年上升。前期研究发现CTBP2的异常表达与前列腺癌的进展密切相关,然而其具体分子机制尚不明确;国内外相关研究提
Φ2.2×6.5米磨机用380千瓦电机就高压与低压问题进行三方面分析比较,得出结果是,采用6000伏比380伏一次投资大,但运行节电效果显著,一年可以收回投资多花的资金。
<正>自主、业余、开放且依存于互联网的公民新闻在一定程度上颠覆了传统新闻的规范,它在媒介的区域环境失范状态下生成、发展,在带来多方面优势的同时也潜藏着诸多隐忧。公民
我国是一个农业大国,9亿多农民的健康权利不容忽视,目前我国的新型农村合作医疗模式存在保障程度低等问题,不能完全满足农民的健康诉求。商业保险公司的商业健康保险能够作为
从中国新亚欧大陆桥经济带中选出具有较高管理类别和一定代表性的 5 3处旅游景区作为研究样本 ,采用定性与定量相结合的方法 ,在对其旅游资源的类型结构、空间结构、界值结构
本文在安徽省1995-2012年城乡居民收入差距现状进行分析的基础上,运用灰色关联分析方法,分析了就业结构、二元对比系数、城乡全社会固定资产投资差距、以人均国内生产总值为