光声显微分子影像的研究

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光声成像是一种新兴的生物医学诊断技术,是以光致超声的物理效应为基础来进行生物组织诊断的成像模式,它结合了纯光学成像的高对比度特性和纯超声成像的高穿透深度特性的优点。为研究生物组织的结构形态、生理特征、代谢功能、病理特征等提供了重要手段。   光声分子影像技术是光声成像技术与分子标记技术的结合,利用外源性的造影剂在分子水平测量进一步得到生物体和病理生理信息,具有高度的特异性、灵敏度。分子标记的基本原理是根据抗原—抗体或配体—受体之间的特异性结合,使连接光声造影剂的靶分子特异性抗体或配体主动结合到组织的抗原或受体,从而实现特异性高灵敏度、高选择性的光声分子影像。   光声显微分子影像既具有光声显微成像的高分辨率和在线探测的特点又具有光声分子影像的灵敏度高和特异性强的特点。为了实现分子水平的光声成像,首先,选择鼻咽癌细胞中表皮生长因子受体EGFR作为分子标记物。EGFR在大多数上表皮癌细胞中过量表达在正常细胞中表达很少或不表达,与细胞的再生和恶性肿瘤的发生、发展密切相关。其次,对鼻咽癌细胞CNE1和永生化鼻咽细胞NP69进行培养,通过Western Blot确定EGFR在两种细胞中的表达。再次,分别利用直接标记法和间接标记法将连有15nm纳米金的EGFR抗体和连有15nm纳米金的二抗IgG作为造影剂增强光声信号连接到两种细胞上。最后,利用课题组研制的高分辨率激光扫面显微成像系统,通过微音器接收获得二维光声图像。结果表明直接标记法更适合本次实验并且能够清楚区分鼻咽癌细胞CNE1和永生化鼻咽细胞NP69。实验表明利用光声显微分子影像技术,可以为肿瘤诊断提供最佳的灵敏度和特异性并且补充了光声功能成像。纳米技术与光声成像技术的结合使用光声成像技术同时进行功能成像和分子成像为肿瘤诊断提供最佳的灵敏度和特异性并且可望在活体内、在细胞与分子水平对病变的分子学改变进行观察和分析,可在病变的早期得出诊断信息。   纳米技术结合光声成像技术将会给光声技术带来空前的变革,使光声成像技术同时进行功能成像和分子影像。可以为肿瘤诊断提供最佳的灵敏度和特异性同时做到功能成像和分子成像,并且将有光声吸收的纳米标记物注入病变组织,标记物捕获目标蛋白并与其相结合,实现高分辨率的光声组织成像推动实现早期诊断和个体化治疗。
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