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目的:青藤碱对许多自身免疫性疾病的炎症反应都具有保护作用,可用于肾病、类风湿性关节炎、红斑狼疮等机体免疫相关性疾病的治疗。溃疡性结肠炎(Ulcerativ e colitis,UC)的发病也和自身免疫紊乱密切相关,而关于青藤碱对溃疡性结肠炎是否有治疗作用,目前未见相关报道。本研究旨在探讨青藤碱对脂多糖(Lipopolysacchar ide,LPS)诱导后巨噬细胞功能的影响,以及青藤碱能否通过TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症应答。 方法:(1)向7~9周雄性Balb/C小鼠腹腔注射高压灭菌的5%淀粉肉汤3天后,腹腔灌洗法分离提取出小鼠腹腔的巨噬细胞,并应用流式细胞术进行细胞表型鉴定;应用MTT法进行药物毒性试验。(2)应用墨汁吞噬法、Transwell技术、ELISA技术分别检测青藤碱对巨噬细胞的吞噬功能、趋化功能以及分泌功能的作用影响。(3)实时定量PCR技术探讨青藤碱对巨噬细胞TLR4、MyD88 mRNA表达水平的影响。(4)细胞免疫荧光技术检测青藤碱作用后巨噬细胞核内NF-κB表达变化。(5)Western-blot方法检测青藤碱对巨噬细胞TLR4、MyD88和p-IκB蛋白表达的影响。 结果:(1)经过腹腔无菌炎症联合LPS(1μg/ml)刺激后,腹腔灌洗法提取出的细胞经流式细胞术鉴定,纯度达95%以上;(2)青藤碱可抑制巨噬细胞的趋化功能以及分泌功能,但对吞噬功能无明显影响;(3)青藤碱可抑制巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路中关键因子如TLR4、MyD88、p-IκB的mRNA和蛋白质的表达,并且能够明显减少细胞核内NF-κB p65的蛋白表达水平。 结论:青藤碱可不同程度地抑制LPS(1μg/ml)刺激后巨噬细胞的多种生物学功能,并且可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活而抑制巨噬细胞的免疫应答反应,为调节炎症反应提供一种新的治疗思路。