白藜芦醇(Resveratrol,Res)是羟基二苯乙烯类多酚化合物,在自然界中分布广泛,具有抗肿瘤、抗菌、保护心血管、抗血小板凝聚、预防动脉粥样硬化、降低糖尿病肾脏组织的内质网应激水平,维持细胞内环境稳态等多种药理活性。除此以外还有很多关于白藜芦醇抗氧化、抗自由基、抑制黑色素生成的报道,但对于白藜芦醇用于治疗皮肤色素沉着的制剂方面的研究较少。白藜芦醇难溶于水、稳定性差,很大程度上限制了其应用。本研究基于白藜芦醇抗氧化、抑制黑色素生成的作用,利用微乳增溶技术制备白藜芦醇微乳凝胶,筛选出最佳处方和制备工艺,并对其进行安全性和功效性评价,为白藜芦醇作为护肤品的开发和应用提供试验依据。第一部分处方前研究目的:建立白藜芦醇含量测定的方法,测定白藜芦醇的油水分配系数,判断其是否适宜制成经皮给药的制剂,并筛选出适宜的透皮接收介质。方法:采用高效液相色谱法测定白藜芦醇的含量,并对色谱条件进行专属性、精密度、稳定性和回收率等方面的考察。通过测定白藜芦醇在正辛醇/水体系中的溶解度,计算出白藜芦醇的油水分配系数。考察白藜芦醇在不同接收介质中的溶解度,筛选出适宜的透皮接收介质。结果:建立的高效液相色谱条件,专属性强、稳定性、精密度和回收率均符合方法学的要求;白藜芦醇的油水分配系数为2.19~2.22,适宜制成经皮给药制剂;确定了透皮接收介质为30%的PEG-400生理盐水。结论:本试验建立的色谱条件符合方法学要求,可用于白藜芦醇的含量测定;白藜芦醇油水分配系数适宜,可制成经皮给药制剂;30%PEG-400生理盐水满足漏槽条件,可作为体外透皮接收介质。第二部分白藜芦醇微乳和微乳凝胶的制备及质量评价目的:考察白藜芦醇微乳及微乳凝胶的处方和制备工艺,并对其进行评价。方法:通过伪三元相图法,以粒径、PDI、稳定性及最高载药量为评价指标,筛选出微乳最佳处方。以黏度和外观为评价指标,通过单因素考察筛选出微乳凝胶的处方和制备工艺,并对其理化性质进行考察。使用雌性SD大鼠的腹部皮肤,考察体外透皮效果和在体皮肤滞留量。结果:白藜芦醇微乳的最终处方为:Res 2.5 g、三乙酸甘油酯6.0 g、RH-40 24.7 g、PEG-400 12.3 g、蒸馏水57.0 g。微乳凝胶的最终处方为:白藜芦醇微乳80.0 g、甘油5.0 g、卡波姆940 0.8 g、蒸馏水15.0 g,用适量三乙醇胺调节pH至6~7。微乳凝胶的粒径为15.30 nm、PDI为0.344、黏度为12417~12577 cP、pH值为6.17±0.04。混悬液、微乳和微乳凝胶的稳态透皮速率分别为5.01、23.46、33.80μg/cm~2/h,制备的微乳凝胶体外透皮符合零级动力学模型。微乳凝胶12 h和24 h的皮肤滞留量高于微乳组和混悬液组。结论:制备的微乳凝胶外观澄清透明、黏度适宜,增加了药物的经皮渗透量和皮肤滞留量。第三部分白藜芦醇微乳凝胶的安全性及功效性评价目的:考察白藜芦醇微乳凝胶作为美白护肤品的安全性和功效性。方法:通过小鼠经口毒性试验和人皮肤贴斑试验考察制剂的安全性。考察制剂对A375人恶性黑素瘤细胞和斑马鱼体表黑色素生成的影响,对制剂的美白功效进行评价。结果:小鼠连续经口灌服200 mg/kg体重剂量的辅料、白藜芦醇微乳和药物混悬液一周,无明显体重变化,进水、进食及肢体活动正常,主要脏器的组织切片无病理性改变。人皮肤贴斑试验结果为阴性。A375细胞内酪氨酸酶活性和黑色素含量随着作用时间的延长,逐渐降低。白藜芦醇微乳组抑制斑马鱼体表黑色素生成的效果比混悬液组好。浓度为1μmol时,抑制黑色素生成的效果最好。结论:初步判定制备的白藜芦醇微乳凝胶具备美白功效,且安全性高,对皮肤无刺激性,在治疗皮肤色素沉着的护肤品领域具有一定的开发价值。