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目的:探讨脂联素对代谢相关脂肪性肝病小鼠(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)肝脏脂质沉积的改善作用及其机制。方法:7周龄雄性C57BL/6J小鼠34只(22-25g)适应性喂养1周后,随机分成2组:对照组(Control group,CON)12只,代谢相关脂肪性肝病组(metabolic associated fatty liver disease group,MAFLD)22只。CON组给予普通饲料,MAFLD组给予高脂饲料。饲养小鼠期间,记录每周体重及摄食量。喂养8周末,禁食、不禁水过夜12 h后行腹腔注射糖耐量实验(IPGTT);从CON组和MAFLD组各随机抽取2只处死取肝脏组织行HE染色,评估代谢相关脂肪性肝病小鼠模型的建立成功与否。8周后将MAFLD组随机分为代谢相关脂肪性肝病组(MAFLD,n=10)和脂联素干预组(MAFLD+APN,n=10)10只。给予MAFLD+APN组腹腔注射外源性重组脂联素,每天每只15μg/kg;CON和MAFLD组给予相应剂量0.9%氯化钠溶液;共6周。脂联素干预6周后测量空腹血糖,留取血清和肝脏组织标本。采用生化法测定血清血脂含量;ELLSA法测定血清APN、IL-6、TNF-α及空腹胰岛素水平;通过肝组织HE染色观察肝脏组织病理形态变化及测定肝脏甘油三脂、总胆固醇含量;Western Blot技术检测肝脏组织中p-AKT、SREBP-1c、ACC、p-ACC、AMPK、p-AMPK、PPAR-α的表达。结果:1高脂饮食诱导的代谢相关脂肪性肝病小鼠模型的建立高脂饮食干预前,两组小鼠体重无差异。高脂饮食干预8周,第1周后开始MAFLD组较CON组小鼠体重显著增加(P<0.05)。与CON组相比,MAFLD组小鼠的摄食量显著增加;MAFLD组小鼠在0 min、30 min、60 min、120 min血糖水平较CON组显著升高(P<0.05);MAFLD组的葡萄糖曲线下面积较CON组显著增加(P<0.05)。H&E染色:MAFLD组:肝细胞结构紊乱、肝细胞肿胀导致肝细胞核移位,胞浆内可见大小不等的脂滴空泡。CON组:肝细胞结构完整,为正常肝小叶,肝静脉较薄,排列整齐的肝索向汇管区辐射,分布于整个肝组织,胞浆均匀红染,未见脂滴空泡。2脂联素对MAFLD小鼠体重、肝湿重和摄食量的影响MAFLD组小鼠体重较CON组明显升高(P<0.05);与MAFLD比较,MAFLD+APN组小鼠体重在脂联素干预6周后显著降低(P<0.05)。MAFLD组小鼠肝湿重较CON组小鼠显著升高(P<0.05);与MAFLD组小鼠比较,MAFLD+APN组肝湿重显著降低(P<0.05)。MAFLD组小鼠的摄食量显著高于CON组小鼠(P<0.05);与MAFLD组小鼠比较,MAFLD+APN组小鼠摄食量显著降低(P<0.05)3脂联素对MAFLD小鼠肝脏形态和甘油三脂、总胆固醇含量的影响3.1各组小鼠肝脏TG、TC含量比较:与CON组相比,MAFLD组肝脏TG、TC含量显著增加(P<0.05);MAFLD+APN组肝脏TG、TC含量较MAFLD组显著减少(P<0.05)。3.2 H&E染色中CON组:肝细胞结构完整,为正常肝小叶,肝静脉较薄,排列整齐的肝索向汇管区辐射,分布于整个肝组织,胞浆均匀红染,未见脂滴空泡。MAFLD组:肝细胞结构紊乱、肝细胞肿胀导致肝细胞核移位,出现大量脂肪小空泡。MAFLD+APN组:肝细胞脂肪变性程度显著减轻,脂滴空泡显著减少,肝细胞炎症浸润减少。4脂联素对MAFLD小鼠血脂的影响MAFLD组小鼠血清甘油三脂、总胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇较CON组显著升高(P<0.05)。MAFLD+APN组小鼠较MAFLD组血清甘油三脂、总胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇显著降低(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P<0.05)。5脂联素对MAFLD小鼠胰岛素抵抗的影响MAFLD组小鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平较CON组显著升高(P<0.05),MAFLD+APN组小鼠空腹血糖、空腹胰岛素较MAFLD组显著降低(P<0.05)。MAFLD组HOMA-IR较CON组显著升高(P<0.05),MAFLD+APN组小鼠HOMA-IR较MAFLD组显著降低(P<0.05);MAFLD组小鼠肝组织P-AKT水平较CON组显著降低(P<0.05),MAFLD+APN组小鼠肝组织P-AKT水平较MAFLD组显著升高(P<0.05)。6脂联素对MAFLD小鼠促炎介质TNF-α、IL-6和保护性脂肪因子APN的影响MAFLD组小鼠血清和肝脏组织TNF-α、IL-6水平较CON组显著升高(P<0.05),MAFLD+APN组小鼠血清和肝脏组织TNF-α、IL-6较MAFLD组显著降低(P<0.05)。MAFLD组小鼠血清和肝脏组织APN水平较CON组显著降低(P<0.05),MAFLD+APN组小鼠血清和肝脏组织APN水平较MAFLD组显著升高(P<0.05)。7脂联素对MAFLD小鼠肝脏脂代谢相关蛋白质表达的影响MAFLD组小鼠肝脏组ACC、SREBP-1c水平较CON组显著升高(P<0.05)。MAFLD+APN组小鼠肝脏组织ACC、SREBP-1c较MAFLD组显著降低(P<0.05)。MAFLD组小鼠肝脏组织p-ACC、PPAR-α、AMPK、p-AMPK水平较CON组显著降低(P<0.05),MAFLD+APN组小鼠肝脏组织p-ACC、PPAR-α、AMPK、p-AMPK较MAFLD组显著升高(P<0.05)。结论:1.脂联素干预可以改善代谢相关脂肪性肝病小鼠的高脂血症,胰岛素抵抗,炎症反应进而改善代谢相关脂肪性肝病小鼠的肝脏脂质沉积。2.脂联素可能是通过激活AMPK进而提高肝脏组织p-ACC、PPAR-α水平,降低SREBP-1c水平达到抑制脂质合成促进脂肪酸β-氧化的效果进而改善代谢相关脂肪性肝病小鼠的肝脏脂质沉积。