本研究以贯叶金丝桃的干燥地上部分为原料，采用超声波辅助法和回流法对甲醇、乙醇和丙酮溶剂体系的提取条件进行系统研究，考察了高效液相色谱法(HPLC)的方法学，对贯叶金丝桃中芦丁、金丝桃苷和槲皮素进行含量测定，建立了贯叶金丝桃HPLC指纹图谱。　　 1．共收集贯叶金丝桃药材14批、提取物和制剂各2批，并对贯叶金丝桃药材进行生药学鉴定。　　 2．贯叶金丝桃药材成分的提取条件研究　　 (1)提取方法筛选，以甲醇和乙醇为溶剂，采用超声波辅助提取法、回流法、索氏提取法及渗漉法提取，通过HPLC分析，根据检测到峰的个数及峰高，选取超声波辅助和回流提取。　　 (2)提取条件选择，采用超声波辅助法和回流法对甲醇、乙醇和丙酮溶剂体系的提取条件进行单因素（溶剂浓度、料液比、提取时间、提取次数及超声功率）实验，在λ,=589nm下比色和HPLC进行检测，确定了贯叶金丝桃中有效成分的提取工艺，即：以100％丙酮超声提取，料液比1:40，超声3次，每次40min，超声功率为200W。　　 3．高效液相色谱条件的考察　　 高效液相色谱方法学研究，考察五种流动相，并对流动相的梯度洗脱程序进行研究，且考察了检测波长、流速，最终确定的色谱条件：色谱柱Diamonsil(?)C18(250mm×4.6mm，5μm);流动相：乙腈（10％甲醇、0.2％甲酸）-水（20％甲醇、0.2％甲酸）梯度洗脱，0～5min时乙腈10％，5～15min时乙腈10％→40％，15～40min时乙腈40％→90％，40～50min时乙腈90％→100％，50～65min时乙腈100％，65～66min时乙腈100％→10％;检测波长为270nm;流速为1.0ml/min;柱温为室温；进样体积：20μL。　　 4．样品中芦丁、金丝桃苷和槲皮素含量的同时测定　　 以贯叶金丝桃药材、提取物、制剂及原药的花、叶、茎为对象，用HPLC进行含量测定。进行了方法学考察，精密度、重现性和稳定性的RSD均在3％以内，符合要求。标准曲线的线性（芦丁22.7～227.0μg/mL，金丝桃苷24.0～240.0μg/mL，槲皮素39.7～397.0μg/mL）关系良好。药材中，14号陕西凤县药材中芦丁和金丝桃苷含量最高，均为：0.251％，甘肃陇西药材中槲皮素含量最高为0.097％。中间提取物中，杨陵沃森的芦丁、金丝桃苷和槲皮素含量较高，分别为：0.511％、0.342％、0.974％。制剂中，Perika的芦丁、金丝桃苷含量较高，分别为：1.138％和0.759％，Nature Made中槲皮素含量较高为1.219％。叶中的芦丁含量最高，为0.085％，花中的金丝桃苷和槲皮素含量最高，为0.118％和0.163％。　　 5．贯叶金丝桃HPLC指纹图谱的建立　　 贯叶金丝桃药材HPLC指纹图谱共确立13个共有峰，其中14批药材中10批药材的相似度大于0.90。贯叶金丝桃提取物HPLC指纹图谱共确立15个共有峰，2批提取物的相似度大于0.97。贯叶金丝桃制剂HPLC指纹图谱共确立15个共有峰，2批制剂的相似度大于0.93。最后考察了花、叶、茎不同用药部位HPLC指纹图谱，共确立25个共有峰，只有花的相似度大于0.90，故应选用花、叶较多的药材入药。　　 本实验对贯叶金丝桃指纹图谱的研究，为贯叶金丝桃原药材质量标准的建立提供了重要指导，是该药材提取物及制剂质量控制的基础，是贯叶金丝桃的药效安全评价及合理利用的重要依据。