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胰腺癌是全世界最常见的消化道恶性肿瘤之一,具有病程短、发展快和病死率高等临床特点。替吉奥联合塞来昔布的治疗模式可以提供一种更好的可持续的晚期胰腺癌的治疗方案,通过抑制肿瘤细胞的增殖来发挥抗肿瘤效应,在临床上具有重要意义。目的:本研究旨在探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合替吉奥对胰腺癌细胞增殖和侵袭的抑制作用,并对其相关的作用机制及调控通路进行探讨。方法:我们通过研究两种药物对胰腺癌细胞系PANC-1体外生长的抑制作用,观察使用药物对胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤生长的影响,分析替吉奥联合塞来昔布对胰腺癌细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制。体外实验通过将不同浓度的两种药物按照实验分组,分别单独或联合作用于各组胰腺癌PANC-1细胞株。通过MTT法检测药物对胰腺癌细胞的增殖的影响,评估联合用药效果;DAPI染色后观察细胞凋亡的形态学改变;运用Western印记检测Survivin蛋白、Bcl-2蛋白、Caspase-3蛋白、BAX蛋白和PARP蛋白的表达情况;通过流式细胞仪检测两种药物对胰腺癌细胞的细胞周期变化的影响;利用PCR检测不同处理后的各组细胞Survivin和COX-2的表达情况。运用划痕实验和细胞基质粘附实验检测对细胞侵袭和迁移能力的影响。体内实验通过建立胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后将裸鼠随机分组后,连续给药21天后,取材,测量各组裸鼠的肿瘤体积大小、计算对应的抑瘤率,免疫组化检测各组裸鼠移植瘤中Survivin的表达情况。结果:细胞增殖测定法和流式细胞仪检测结果均显示塞来昔布和替吉奥能诱导PANC-1的凋亡并呈剂量依赖性,两药联合使用对胰腺癌细胞增殖的抑制作用较单药使用更为明显。DAPI染色显示药物使得细胞呈现典型的凋亡形态特征。Western印迹结果显示替吉奥和塞来昔布可以促使Bax蛋白和PARP蛋白表达上调,Survivin蛋白和Bcl-2蛋白的表达下调,同时伴随有Caspase-3蛋白活化表达明显上调。RT-PCR结果显示替吉奥和塞来昔布都可下调胰腺癌细胞的Survivin和COX-2的表达,但联合使用后的下调效果更为显著。体内动物实验显示替吉奥和塞来昔布可以抑制裸鼠移植瘤的生长,用药后Survivin表达较对照组明显降低(P<0.01),联合用药与单药相比较也存在差异性(P<0.05),联合用药后的下调效果更明显。结论:替吉奥和塞来昔布对胰腺癌PANC-1细胞的生长具有抑制作用,联合用药效果显著。其机制可能与下调Survivin、Bcl-2等的抗凋亡蛋白表达及COX-2的表达,活化Caspase-3蛋白表达促进从而诱导细胞的凋亡和细胞周期的停滞有关。替吉奥联合塞来昔布可以减弱胰腺癌PANC-1细胞的侵袭、迁移和粘附能力。