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目的1.临床研究观察和肾络颗粒的临床疗效。2.实验研究从microRNA层面探讨和肾络颗粒干预慢性肾衰竭的可能机制。方法1.临床研究选取82例慢性肾衰竭患者,随机分为治疗组和对照组,分别服用和肾络颗粒和尿毒清颗粒,观察3个疗程,监测患者临床症状,血常规、血生化、尿沉渣microRNA等指标的变化,采取组内与组间比较。2.实验研究实验一:以大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型为研究对象,灌服和肾络颗粒,术后28天处死,留取病变侧肾脏组织,采用microRNA芯片筛选出差异表达显著的microRNA。实验二:制备和肾络颗粒含药血清,以HK-2细胞为研究对象,TGF-β1诱导肾小管上皮细胞间质转分化,用含药血清干预,通过Western blot、Realtime PCR等方法检测a-SMA、E-cadherin、ZEB1、ZEB2及其mRNA和microRNA-141 的表达。实验三:用microRNA-141模拟物mimic和抑制物inhibitor瞬时转染HK-2细胞,给予含药血清处理,继续观察实验二中相关指标的变化。结果1.临床研究①两种药物均能降低血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(Ccr),但治疗组优于对照组(P<0.05)。②两种药物均可降低患者甘油三酯(TC)、胆固醇(TG),升高血白蛋白(ALB),但治疗组优于对照组(P<0.05)。③两种药物均可升高血红蛋白(HGB),但治疗组优于对照组(P<0.05)。④两种药物均可在一定程度上升高患者尿沉渣miRNA-141,且治疗组在第2月结束后就可有明显差异,明显优于对照组(P<0.05)。⑤两种药物均可在一定程度上降低患者中医证候积分,且治疗组优于对照组(P<0.05)。⑥经过6个月治疗后,治疗组有效率80%,对照组总有效率59%,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。2.实验研究实验一:microRNA芯片筛选出差异表达显著的microRNA共26个,其中上调16个,下调10个。实验二:①TGF-β1作用36h后,a-SMA及其mRNA表达明显升高,E-cadherin及其mRNA表达明显降低,符合肾间质纤维化改变。②含药血清可有效逆转TGF-β1诱导的HK-2细胞EMT,含药血清可降低a-SMA、ZEB1、ZEB2及其mRNA表达,升高E-cadherin及其mRNA表达,升高microRNA-141表达。实验三:①转染microRNA-141mimic后,α-SMA、E-cadherin及其mRNA表达与空白组相比没有明显变化。转染microRNA-141 inhibitor 36h后,上皮标志物E-cadherin显著降低,间质标志物a-SMA显著升高,出现了类似TGF-β1诱导之后的变化。②含药血清可降低α-SMA、ZEB1、ZEB2及其mRNA表达,升高E-cadherin及其mRNA表达,升高microRNA-141的表达,可有效逆转转染microRNA-141 inhibitor后HK-2细胞的变化。结论1.临床研究和肾络颗粒可有效减轻患者症状、改善肾功能、改善脂质代谢、升高血红蛋白、白蛋白,在治疗慢性肾衰竭方面,疗效确切。2.实验研究实验一:和肾络颗粒延缓慢性肾衰竭进展机制复杂,可通过干预多个microRNA,多靶点调控。实验二、三:和肾络颗粒可有效逆转肾小管上皮细胞间质转分化,可能是通过激活microRNA-141/ZEB1/ZEB2 环路实现的。