RAD21通过调控c-Myc促进非小细胞肺癌的恶性进展

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【目的】肺癌是目前常见的一种癌症,也是引起癌症相关死亡的主要原因之一。在所有的肺癌组织类型中,非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)侵袭性最高,5年生存率较低(小于15%)。本课题组既往研究发现RAD21在NSCLC组织中高表达,与患者生存率呈负相关。据此,我们推测,RAD21可能通过某种机制影响NSCLC的发生、发展。因此,在这次研究中,我们旨在观察RAD21对非小细胞肺癌恶性生物学行为的影响,进一步研究RAD21是否通过调控c-Myc影响非小细胞肺癌的恶性生物学行为。【方法】1.购买三种NSCLC细胞系(A549、H226、BEAS-2B)。2.逆转录定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测NSCLC中RAD21和c-Myc的表达水平。3.评估RAD21和c-Myc在NSCLC细胞系(A549,H226)中的敲低效率,选择敲低效率最高的一组,分别通过Ed U实验、伤口愈合实验、Transwell和流式细胞实验研究RAD21和c-Myc对NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。4.在敲低RAD21的NSCLC细胞系(A549、H226)中分别转染c-Myc过表达载体(pc DNA3.1/c-Myc)和其阴性对照载体,通过Ed U实验、伤口愈合实验、Transwell和流式细胞实验研究c-Myc对NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。【结果】1.NSCLC细胞系(A549和H226)中RAD21和c-Myc的m RNA和蛋白质表达水平明显高于BEAS-2B细胞。2.敲低RAD21和c-Myc抑制了NSCLC细胞系(A549和H226)的增殖、迁移和侵袭能力,促进了NSCLC细胞的凋亡能力。3.敲低RAD21显著抑制了c-Myc的表达。c-Myc表达上调逆转了RAD21敲低对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的抑制能力以及细胞凋亡的促进能力。【结论】RAD21和c-Myc在NSCLC细胞系中高表达,敲低RAD21和c-Myc可以抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭,并且可以促进NSCLC细胞的凋亡,RAD21通过调控c-Myc促进非小细胞肺癌的恶性生长发展。
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