傣医解药“雅解沙把”对肝药酶活性影响的研究

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目的 本课题采用cocktail探针药物法,对肝药酶亚型CYP1A2、CYP2C19、CYP2E1、CYP3A4活性的影响进行研究,明确“雅解沙把”解药物毒作用的机制,进一步揭示傣医特色理论“雅解”(解毒)学说和“雅解”(解毒)方药的科学内涵,为指导临床合理用药和民族药新药的研究开发提供实验依据。方法 体内实验 取雌雄各半健康SD大鼠24只,按体重随机分为空白对照组、阳性对照组(苯巴比妥钠组)、雅解沙把低剂量组、雅解沙把高剂量组,各组灌胃(ig)给药体积为1ml/100g bw,1次/d,连续给药7d。末次给药禁食不禁水18h后,给Cocktaill探针药物溶液。麻醉大鼠后按下列时间行眼底静脉丛取血:10、30、50、70min,1.5、2、2.5、3、5、8、12h。HPLC方法测定上述各时间点大鼠血液中探针药物(奥美拉唑、氯唑沙宗)含量的变化,计算药代动力学参数,以此评价雅解沙把对肝药酶CYP2C19、CYP2E1的影响。体外实验 地实验动物分组同体内部分,各组灌胃(ig)给药体积为1ml/100g bw,1次/d,连续给药7天。末次给药禁食不禁水18h后处死取肝脏,对比改良的Omura法、蔗糖溶液悬浮法、磷酸盐缓冲液悬浮法,确定最佳肝微体的制备方法,分别对不同的p H、孵育温度、孵育时间进行考察,确定最佳肝微粒体混合酶系孵育条件。精密抽取探针溶液混合到肝微粒体混合酶系当中,按样品处理方法处理后取上清液进样。测定体外代谢中探针药物(咖啡因、氨苯砜、奥美拉唑、氯唑沙宗)含量的变化,计算药代动力学参数,以此评价雅解沙把对肝药酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2C19、CYP2E1的影响。结果 体内实验部分:奥美拉唑代谢情况:连续灌胃(ig)雅解沙把7d后,与空白对照组比较,雅解沙把高剂量组(2.43g生药/kg)对奥美拉唑的清除率(CL/F)明显增强,曲线下面积(AUC)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),其半衰期(t1/2)与空白对照组比较,有减少趋势,但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。氯唑沙宗代谢情况:连续灌胃(ig)雅解沙把7d后,与空白对照组比较,雅解沙把高剂量组(2.43g生药/kg)和低剂量组(0.27g生药/kg)对氯唑沙宗的清除率(CL/F)明显增强,曲线下面积(AUC)明显减少,半衰期(t1/2)明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。体外实验部分:与空白对照组比较,“雅解沙把”低剂量组和高剂量组氯唑沙宗的含量显著降低(P<0.01),同时,“雅解沙把”高剂量组氨苯砜和奥美拉唑的含量明显降低(P<0.05),组间比较,差异具有统计学意义。“雅解沙把”低剂量组和高剂量组虽也有促进咖啡因代谢作用的趋势,但与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结果提示,“雅解沙把”能促使氨苯砜、氯唑沙宗和奥美拉唑的的体外代谢,可能是肝药酶CYP3A4、CYP2C19、CYP2E1的促进剂。结论 “雅解沙把”对CYP450亚型CYP3A4,CYP2E1,CYP2C19有诱导作用,能够加速药物代谢,提高肝药酶活性从而达到解药物毒的作用。
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