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目的:探讨慢病毒介导的Eca109细胞WISP2过表达对裸鼠食管癌的影响方法:1.MTT细胞增殖实验检测WISP2稳定过表达后对食管癌Eca109细胞生长增殖情况的影响;2.Transwell小室侵袭实验观察WISP2稳定过表达对食管癌Eca109细胞侵袭能力的影响;3.细胞划痕实验观察WISP2稳定过表达对食管癌Eca109细胞转移能力的影响;4.real time PCR检测各组癌细胞中WISP2、E-cadherin基因表达情况;5.构建裸鼠食管癌模型,分为三组,Eca109空白组、Eca109-空载体组、Eca109-WISP2过表达组。选择于裸鼠右腋窝下注入适量细胞悬液,定期测量裸鼠肿瘤体积,记录并处理数据,并绘制肿瘤生长曲线;21天后,颈椎脱臼法处死裸鼠,取出肿瘤组织,称取每组每个肿瘤的重量观察肿瘤体积的变化;6.每组取出适量裸鼠瘤体组织,提取瘤体组织细胞总RNA,real time PCR检测各组癌组织中WISP2、E-cadherin基因表达情况;7.每组取出适量瘤体组织,提取瘤体组织总蛋白,Western Blotting法检测每组瘤体组织中WISP2、E-cadherin蛋白的表达情况;8.免疫组织化学法检测每组移植瘤组织中WISP2、E-cadherin的蛋白表达情况,并分析二者之间的关系。结果:1.MTT细胞增殖实验结果显示,WISP2稳定过表达细胞株(Eca109-WISP2过表达组)的细胞增殖能力明显低于Eca109-空白组及Eca109-空载体组,p<0.05,差异均有统计学意义;但空白组与空载体组细胞增殖能力之间的差异无统计学意义,p>0.05。2.Transwell小室侵袭实验WISP2稳定过表达细胞株的侵袭能力明显低于空白组组及空载体组细胞,p<0.05,差异均有统计学意义;但空白组与空载体组细胞侵袭能力相比较,p>0.05,差异无统计学意义。3.细胞划痕实验结果显示,WISP2稳定过表达组细胞的转移能力明显低于空白组及空载体组细胞,p<0.05,差异均有统计学意义;但空白组与空载体组细胞转移能力相比较,p>0.05,差异无统计学意义。4.细胞real time PCR实验结果显示,WISP2稳定过表达组WISP2、E-cadherin基因表达水平明显高于空白组和空载体组,且差异具有统计学意义,p<0.05。5.裸鼠食管癌模型构建成功,成瘤率100%,WISP2稳定过表达细胞组肿瘤生长体积明显低于空白体组及空载体组,p<0.05,差异均有统计学意义,但空白组与空载体组肿瘤生长体积相比较,p>0.05,差异无统计学意义;WISP2稳定过表达细胞组肿瘤最终体重明显低于空白组与空载体组,差异均有统计学意义,空白组与空载体组肿瘤最终体重相比较,其差异无统计学意义。6.裸鼠瘤体组织real time PCR实验结果显示,WISP2稳定过表达肿瘤组织中WISP2、E-cadherin基因表达水平明显高于空白组与空载体组,且差异均有统计学意义,p<0.05。8.裸鼠瘤体组织Western Blotting实验结果显示,WISP2稳定过表达组WISP2蛋白持续性高表达,明显高于空白组与空载体组,且差异均有统计学意义,空白组与空载体之间差异无统计学意义。同时WISP2稳定过表达组E-cadherin表达明显高于空白组与空载体,相比较差异均有统计学意义,但空白组与空载体之间差异无统计学意义,p>0.05。7.裸鼠肿瘤组织免疫组化结果显示WISP2稳转组中WISP2、E-cadhein蛋白表达量明显增多于空白组及空载体组,且差异均有统计学意义,p<0.05。结论:1.WISP2稳定过表达显著地降低了食管癌细胞的增殖能力;2.WISP2稳定过表达显著地抑制食管癌细胞的侵袭和迁移能力;3.WISP2稳定过表达后的食管癌Eca109细胞可以在裸鼠体内成瘤,且可以明显抑制裸鼠肿瘤的生长体积及肿瘤重量。4.体内实验证实WISP2稳定过表达后可以促进E-cadherin的表达,E-cadhein的升高可以逆转上皮间质转化,降低肿瘤的增殖侵袭转移能力,提示WISP2可能在食管癌治疗中成为一个新的生物治疗靶点。