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目的：研究显示表皮生长因子(Epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变、扩增或蛋白阳性表达与表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors of the epidermal growth factor receptor, EGFR-TKIs)的良好疗效相关,而K-ras突变则与耐药联系。血管表皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)蛋白阳性表达与非小细胞肺癌的抗血管生成药物有较好的疗效相关。切除修复交叉互补基因1(Excision repair cross complementing 1, ERCC 1)蛋白阳性表达是预测铂类耐药的重要指标。本文拟观察大细胞肺癌(LCLC) EGFR.原癌基因K-Ras. ERCC 1及VEGF的突变/表达、其间关联性及其对预后的影响,初步探索EGFR-TKIs.化疗和抗血管生成治疗在LCLC患者中可能的优、劣势人群。同时,评价实时定量PCR法对检测EGFR和K-ras突变的可靠性。方法：对60例LCLC患者分别应用直接测序法检测EGFR18-21外显子及K-Ras第2外显子基因突变状况、荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)法检测EGFR基因扩增状况,免疫组织化学法(Immunohistochemistry, IHC)检测EGFR、VEGF及ERCC1蛋白水平表达情况,与随访资料做比对分析,观察EGFR-TKIs、化疗和抗血管生成治疗相关基因之间的关系及其对预后的影响,阐明可能影响疗效或预后的分子基础。实时定量荧光PCR法对石蜡包埋的大细胞肺癌标本进行EGFR和K-Ras突变的检测并与直接测序法的结果进行比对。结果：直接测序法发现1例(1.7%)出现EGFR基因L858M点突变、3例(5.0%)出现K-Ras基因突变(2例G12C突变和1例G12D突变)；RT-PCR方法结果显示6例(10%)含EGFR突变(1例EGFR 2254-2277Del突变,1例G719C突变和4例L858R突变),4例(6.7%)K-Ras突变(3例G12C突变和1例G12V突变)；仅两例突变结果一致。高EGFR基因拷贝数(EGFR FISH检测阳性)见于19.6%(10/51)的患者,EGFR、ERCC1、VEGF蛋白表达的阳性率分别为38.3%、56.7%和70.0%。EGFR FISH阳性更常见于EGFR蛋白表达阳性的患者(Spearman’s相关系数=0.390,P=0.005),且有统计学意义。趋势显示EGFR FISH阳性更常见于ERCC1蛋白表达阳性(P=0.433)和K-Ras野生型(P=0.486)的患者,K-Ras突变更常见于ERCC1蛋白表达阴性(P=0.411)和VEGF (P=0.252)蛋白表达阳性的患者,但无统计学意义。EGFR、K-Ras、ERCC1和VEGF(?)司未发现统计学意义的联系。与无淋巴结转移者相比,VEGF蛋白表达阳性更常见于有淋巴结转移的患者(84.6% vs 58.8%,P=0.046),而EGFR FISH、EGFR蛋白表达、K-Ras突变和ERCC1蛋白表达状态与分析的临床病理特征无关。单因素分析显示,淋巴结转移(P=0.049)、晚期(P=0.000)患者预后较差。多因素分析显示,仅TNM分期(HR=3.347,95%CI=1.791-6.254,P=0.000)是影响预后的独立因素。各生物标志物状态与预后无关。结论：与肺腺癌相比,较低的EGFR突变和扩增率提示较少的LCLC患者能从EGFR-TKIs治疗获益,EGFR基因扩增可能是导致LCLC患者EGFR蛋白过表达的机制之一。EGFR、K-Ras、ERCC1和VEGF基因间未发现明确的关联性。VEGF蛋白阳性表达可能是LCLC的负性预后因子,EGFR、K-Ras、ERCC1及VEGF标记物的状态与预后无关,仅淋巴结转移及TNM分期是影响预后的因素,多因素分析则仅显示TNM分期是影响预后的独立因素。RT-PCR法行突变检测未能很好的与直接测序法结果相吻合,临床应用尚需行进一步的研究验证。