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目的在分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血T细胞和组织新鲜标本（癌，癌旁组织）浸润淋巴细胞（TILs）Tim3表达差异的基础上，通过体内外实验探讨T-bet/Eomes是否参与了对Tim3表达的调节，并进一步初步分析肿瘤微环境中Tim3表达的可能影响因素，为深入研究Tim3作为肿瘤免疫治疗的新靶点的可行性提供实验依据。方法（1）收集手术切除且诊断明确的非小细胞肺癌（NSCLC）患者癌组织及癌旁组织，同时采集同一患者外周血，经免疫荧光标记和流式细胞仪分析检测Tim3在在外周血T淋巴细胞和肿瘤浸润T淋巴细胞的表达；（2）采用C57BL/6WT和T-bet-/-/Eomes-/-DKO小鼠，富集小鼠脾脏T细胞，体外经Th1型分化诱导；同时构建Lewis肺癌模型，分离小鼠脾脏T细胞和肿瘤浸润淋巴细胞，免疫荧光标记和流式细胞术检测Tim3的表达情况，分析T-bet和Eomes是否参与了对Tim3表达的调节；（3）收集人非小细胞肺癌标本（癌组织和癌旁组织），抽提癌组织和癌旁组织RNA，经过逆转录、Real-TimePCR检测IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β、TNF、PD-L1、galectin-9、FoxP3、GATA3、T-bet、Eomes mRNA的相对表达量，初步筛选Tim3表达调节的可能影响分子。结果1.与癌旁正常组织浸润淋巴细胞相比，非小细胞肺癌患者肿瘤组织浸润淋巴细胞（TILs）表面Tim3的表达明显上调；非小细胞肺癌患者外周血T细胞几乎不表达Tim3；2.负性共刺激分子Tim3在非小细胞肺癌肿瘤组织浸润淋巴细胞呈现中度表达和低表达，部分非小细胞肺癌患者肿瘤组织Tim3低表达；3.小鼠脾脏T淋巴细胞体外经Th1分化条件培养，T细胞，尤其是CD8+T细胞表面Tim3的表达在T-bet/Eomes双敲基因（DKO）小鼠受到明显抑制。4.在小鼠lewis肺癌肿瘤模型中，脾脏淋巴细胞表面Tim3表达也受到T-bet/Eomes的调节，而荷瘤小鼠肿瘤浸润淋巴细胞表面Tim3的表达并不受T-bet/Eomes的调节；5.肿瘤组织浸润淋巴细胞表面Tim3中度表达组与Tim3低表达组相比，EomesmRNA表达呈现显著升高，TNF-，IL-1β，IL-10三个因子表达显著降低（p<0.01），而TGF-β、IL-6、T-bet和Gata3等的表达无显著差异。6.与癌旁组织相比，癌组织中Foxp3，IL-17以及Tim3配体Galectin-9mRNA表达显著升高，而IL-1β则显著降低（p<0.01）。结论与癌旁正常组织浸润淋巴细胞相比，非小细胞肺癌患者肿瘤组织浸润淋巴细胞（TILs）表面Tim3的表达明显上调；非小细胞肺癌患者外周血T细胞几乎不表达Tim3；部分非小细胞肺癌患者肿瘤组织Tim3低表达。T-bet/Eomes参与了Tim3在外周免疫器官表达的调节，但Tim3在肿瘤浸润T淋巴细胞的表达可能和肿瘤微环境的诱导有关，Foxp3，IL-17以及Tim3配体Galectin-9mRNA在肿瘤组织的表达较癌旁组织显著升高，肿瘤组织Tim3中表达组中细胞呈现高耗竭状态，TNF-，IL-1β，IL-10等炎性因子表达显著降低。