类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA)是一种高度致残性自身免疫性疾病，临床特征为对称性多关节炎，病理改变为滑膜炎、软骨及骨的破坏。趋化因子诱导的炎症细胞浸润是RA滑膜炎形成和持续存在的原因，是引起滑膜增生，血管翳形成，软骨和骨破坏的前提。近年研究发现间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）具有免疫调节作用，可抑制RA患者体内炎性趋化因子的表达。间充质干细胞来源的胞外囊泡（Mesenchymal stem cells derived extracellular vesicles,MSC-MVs）是MSCs产生的异质性膜分泌体，目前已证实微泡能模拟其母体细胞的免疫调节作用，有可能成为RA治疗的新手段。　　目的：　　观察hUCMSC-MVs静脉注射对CIA大鼠干预疗效；探讨hUCMSCs-MVs对CIA大鼠血清及滑膜中趋化因子MCP-1、IP-10、SDF-1表达的影响，从趋化因子角度阐明hUCMSCs-MVs治疗RA作用机制。　　方法：　　1.体外分离、培养人hUCMSCs，差速离心法分离hUCMSCs-MVs，用透射电子显微镜观察MVs形态、大小。　　2.建立CIA模型：饲养Wistar大鼠，弗氏完全佐剂加II型胶原乳液2次免疫动物，观察大鼠症状（大体观、关节炎指数、双足肿胀度）、病理评估，建立CIA模型。　　3.实验分组：造模成功的CIA大鼠随机分为CIA组、MTX组、hUCMSCs组、hUCMSCs-MVs低浓度组、hUCMSCs-MVs中浓度组、hUCMSCs-MVs高浓度组，同时设立正常对照组，每组6只。　　4.给药方法：加强免疫后第二天进行干预。hUCMSCs组大鼠尾静脉注射数量为2×106个hUCMSCs/Kg/鼠，hUCMSCs-MVs低、中、高浓度组大鼠静脉注射MVs量分别为为30μg/100μl/鼠、60μg/100μl/鼠、90μg/100μl/鼠，MTX组腹腔注射0.9mg/kg，每周1次，共3周。　　5.疗效及检测指标：分别测量CIA大鼠体重、双足肿胀度、关节炎指数观察hUCMSCs-MVs是否改善CIA大鼠关节炎症；用高通量流式多因子检测技术测定各组大鼠血清中MCP-1、IP-10水平，应用ELISA测定各组大鼠血清中SDF-1水平，应用免疫组化技术检测踝关节滑膜中趋化因子MCP-1、IP-10、SDF-1表达，收集数据进行统计分析。　　结果：　　1.hUCMSC-MVs干预对CIA大鼠一般情况的影响：　　（1）hUCMSC-MVs鉴定:经透射电子显微镜观察,hUCMSC-MVs为一类直径介于30nm-200nm之间大小不一的囊泡状结构，蛋白质浓度约为2.05μg/μl，符合目前国际公认的鉴定hUCMSCs-MVs的标准。　　（2）hUCMSC-MVs干预对CIA大鼠体重影响：与正常对照组相比，CIA大鼠体重增长程度明显降低（P<0.05），干预后CIA大鼠体重增长程度较前改善，42d时， hUCMSC-MVs高浓度组大鼠体重较CIA组明显升高，有统计学差异（P<0.05）。　　（3）hUCMSC-MVs干预对CIA大鼠关节症状影响:CIA组大鼠较正常对照组足肿胀度明显升高（P<0.05），AI明显升高（P<0.05），干预后CIA大鼠关节肿胀度减轻，AI下降，42d时，CIA组较MTX组足肿胀度、AI较明显升高（P均<0.05）， CIA组与hUCMSCs组、hUCMSC-MVs各组（低、中、高浓度）足肿胀度、AI相近（P均>0.05）。　　（4）hUCMSC-MVs对CIA大鼠踝关节病理的影响:正常对照组大鼠关节腔结构清晰，无或少量滑膜增生及炎性细胞浸润；CIA模型组大鼠滑膜增生明显，大量炎性细胞浸润，部分出现软骨破坏。MTX组、hUCMSCs组、hUCMSC-MVs低、中、高浓度组滑膜增生及炎性细胞浸润明显减少，且高浓度组优于hUCMSCs及MTX组。　　2.hUCMSC-MVs干预对CIA大鼠血清及滑膜中趋化因子水平的影响：　　（1）hUCMSC-MVs对CIA大鼠血清中趋化水平影响：CIA组血清MCP-1、SDF-1水平较正常对照组均明显升高（P<0.05）；CIA组血清MCP-1、SDF-1水平较MTX组明显升高（P<0.05）；CIA组血清MCP-1、SDF-1水平较hUCMSCs组明显升高（P<0.05）；CIA组分别与hUCMSC-MVs低、中、高浓度组比较，CIA组血清MCP-1、SDF-1水平明显升高（P<0.05）；MTX组分别与hUCMSC-MVs低、中、高浓度组比较，各组血清MCP-1、SDF-1水平相当(p均>0.05)，hUCMSC-MVs低、中、高浓度组分别与hUCMSCs组比较，各组血清MCP-1、SDF-1水平相当（p均>0.05）；hUCMSC-MVs低、中、高浓度组之间互相比较，各组血清MCP-1、SDF-1水平相当（p均>0.05）；MTX组与hUCMSCS组血清MCP-1、SDF-1水平接近（p均>0.05）。CIA组血清IP-10水平较正常对照组升高，但无统计学差异（P>0.05）；CIA组与各干预组血清IP-10水平接近（P>0.05）。　　（2）hUCMSCs对CIA大鼠踝关节滑膜中趋化因子表达的影响:CIA组大鼠MCP-1、SDF-1、IP-10表达强阳性，同时滑膜组织增生；正常组滑膜中MCP-1、SDF-1、IP-10呈弱阳性或阴性表达；各干预组滑膜中MCP-1、SDF-1、IP-10呈弱阳性表达。通过半定量分析， CIA组滑膜中MCP-1、SDF-1、IP-10表达较正常对照组明显升高（P<0.05）；CIA组较MTX组MCP-1、SDF-1、IP-10表达明显升高（P<0.05）；CIA组较hUCMSCS组MCP-1、SDF-1、IP-10表达明显升高（P<0.05）；CIA组分别与hUCMSC-MVs低、中、高浓度组比较，CIA组滑膜中MCP-1、SDF-1、IP-10表达明显升高（P<0.05）；MTX组分别与hUCMSC-MVs各组比较，低浓度组滑膜中MCP-1、SDF-1、IP-10表达明显升高(P<0.05)；hUCMSCs组分别与hUCMSC-MVs各组比较，低浓度组滑膜中MCP-1、SDF-1表达明显升高(P<0.05)，低、中浓度组滑膜中IP-10表达明显升高（P<0.05）；hUCMSC-MVs各浓度组之间比较，低浓度组滑膜中MCP-1、SDF-1、IP-10表达较中、高浓度组明显升高（P<0.05）；hUCMSC组滑膜MCP-1、SDF-1、IP-10表达与MTX组接近（P>0.05）。　　结论：　　1.hUCMSC-MVs可明显抑制CIA大鼠滑膜炎症。　　2.hUCMSC-MVs可通过降低CIA大鼠血清中趋化因子MCP-1、SDF-1水平减轻滑膜炎症，不同浓度hUCMSC-MVs作用相当，且MVs与其母体细胞hUCMSC、MTX作用相当。　　3.hUCMSC-MVs可通过抑制CIA大鼠滑膜中趋化因子MCP-1、SDF-1、IP-10表达减轻滑膜炎症，hUCMSC-MVs高浓度组作用优于低、中浓度组，MVs高浓度组与其母体细胞hUCMSCs、MTX作用相当。